小鼠骨髓来源巨噬细胞的永生化方案
小鼠骨髓来源巨噬细胞的永生化方案:1. 在 37 °C、5% CO2 的加湿培养箱中,用 T150 cm2 的 TC 烧瓶,在完全 DMEM 中培养 Cre-J2 病毒生产细胞,直到细胞达到 ~100% 的融合度;2. 吸出细胞中的全 DMEM,用 10 mL 无菌 PBS ···
小鼠骨髓来源巨噬细胞的永生化方案:1. 在 37 °C、5% CO2 的加湿培养箱中,用 T150 cm2 的 TC 烧瓶,在完全 DMEM 中培养 Cre-J2 病毒生产细胞,直到细胞达到 ~100% 的融合度;2. 吸出细胞中的全 DMEM,用 10 mL 无菌 PBS ···
如何用SV40大T抗原永生大鼠腹侧间脑NPCs:按照Timmer等人的方法培养从E12大鼠胚胎中制备的VM祖细胞,在增殖条件下培养3天后,用pSV3-neo核转染细胞以表达SV40Tag,在G418选择条件下培养2周后,通过稀释获得克隆,从四个SV4···
海拉细胞的回溯,细胞系的错误鉴定如何误导了科学文献:虽然细胞系错误识别问题几十年前就已为人所知,但仍有数量不详的已发表论文在没有警告或纠正的情况下报告了错误的细胞,在这里,研究者团队试图对这些“被污染”的文···
SV40永生化大鼠腮腺腺癌细胞株的开发与特征描述:过去几年中,在确定大鼠唾液腺尖突细胞无血清原代培养对营养、激素、氧气和生长的要求方面取得了重大进展,维持尖腺细胞细胞分化和正常分泌功能所必需的重要细胞外基质蛋···
huvec细胞血管形成实验及常见问题:HUVEC 是从脐带静脉内壁分离出来的原代细胞,内皮细胞常用于研究低氧、炎症、氧化应激、感染反应及正常和肿瘤相关血管生成等应用,HUVEC细胞血管实验常见问题:1.稀释基质胶用什么稀释···
huvec人脐静脉内皮细胞培养方法和常见问题:1.将含有1 mL HUVEC细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀;2.在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀;HUVEC细胞必须用专用···
人子宫内膜异位病灶来源的永生化基质细胞系的建立:慢病毒感染建立hTERT诱导的永生化子宫内膜异位基质细胞,与原代细胞相比,ihESCs 中hTERT的mRNA和蛋白质均显着增加,此外,光学显微镜(上图1d)和扫描电镜(下图1d)观察到···
RAW 264.7细胞培养注意事项和常见问题:在培养RAW264.7细胞的过程中容易遇到的问题主要包括以下几种:1.复苏后存活率不高;2.细胞形态发生变异;3.不同形态细胞消化时间不等;4. 细胞生长速度缓慢;当你遇到类似问题时,可尝···
来自CX43野生型和基因敲除小鼠的永生化小鼠皮质星形胶质细胞的构建和鉴定:WT 和 Cx43-Null 星形胶质细胞原代培养物中星形胶质细胞标志物表达水平的量化,以及用 hTERT 转染每种基因型后的通道,永生化皮质星形胶质细胞···
肺癌研究常用细胞系及其优化实验方案:A549肺部上皮样细胞,免疫组化实验显示Karetin阳性;有研究显示该细胞系在不饱和脂肪酸比例较高的条件下,可以合成Lecithin,Calu-1取自肺癌的肋膜转移灶,为上皮样细胞,该细胞系接种···
单克隆稳定株和混合稳定株概念和选择:单克隆稳定株:来源于含有稳定整合外源片段的单个细胞的扩增;混合稳定株:由多个单克隆稳定株混合构成的克隆群,不同的单克隆其外源片段的整合位点不一样;什么时候选择混合克隆稳定···
SV40 T抗原对未成熟和成熟小鼠星形胶质细胞的永生化:永生化癌基因的表达会改变细胞增殖,但保留了明显程度的细胞类型特异性表型,终末分化的永生化细胞保留细胞特异性特征,即星形胶质细胞表达胶质丝蛋白,上皮细胞表达细···
永生化小鼠胸腺上皮细胞的鉴定及功能研究:作为T细胞发育的主要器官,胸腺在产生具有自身耐受适应性免疫功能的成熟T细胞中起着关键作用,T细胞能够识别自身主要组织相容性复合体(MHC)分子,并在胸腺中进行负选择后能够区···
原代细胞分离提取方法及注意事项:原代细胞分离的方法有很多种:悬浮离心法、直接组织块法、酶消化法、非酶消化法、机械分散法;使用细胞分离酶时,请注意温度和湿度条件。如蛋白水解酶可以自动分解,因此建议在使用前立即···
通过Cas9快速鉴定基因组编辑的间充质干细胞单克隆:针对 Cas9 优化的引导 RNA 结构和质粒构建策略,我们成功鉴定了 AAVS1 基因座中过表达 IL-10 的 MSC 单克隆,如前所述将 gRNA 靶序列 (5-GGGGC CACTAGGACAGGAT-3) 克隆···
Safe Harbor 靶向 CRISPR-Cas9 工具用于活体细胞的分子遗传学成像:我们开发了 CRISPR-Cas9 工具来编辑腺相关病毒位点 1 (AAVS1) 安全港的细胞,其中包含编码抗生素抗性基因和报告基因的大型供体构建体 (*6.3 kb) 用于···