MC38小鼠结肠癌细胞皮下成瘤验证

发布时间：2025-09-12 09:00:06 细胞资源库平台访问量：382

小鼠结肠癌细胞系(如MC38、CT26)是研究结肠癌生物学特性及治疗策略的重要工具，其遗传背景明确、增殖稳定且易于在免疫健全或缺陷小鼠中成瘤。构建结肠癌动物模型的重要性在于能够模拟人类结肠癌的发生发展过程，包括肿瘤生长、侵袭、转移及肿瘤微环境演变，从而为揭示疾病机制、评估新型疗法(如化疗药物、免疫治疗或靶向治疗)的有效性与安全性提供关键平台。此类模型不仅加速了临床前药物筛选，还为个体化治疗策略的开发提供了不可替代的实验基础，最终推动结肠癌治疗领域的转化医学进展。

细胞简介

细胞名称：MC38小鼠结肠癌细胞

种属来源：小鼠

组织来源：结肠

生长特性：贴壁生长

细胞形态：上皮细胞样

背景介绍：MC38细胞是一种常用的小鼠结肠腺癌细胞系，其背景源于C57BL/6小鼠。该细胞系并非通过基因工程改造获得，而是在1970年代通过化学致癌剂1,2-二甲基肼(1,2-Dimethylhydrazine, DMH) 诱导C57BL/6小鼠体内产生结肠癌后，从其肿瘤组织中分离并建立而成的。因此，MC38细胞保留了完整的自体免疫背景，当其接种于同系的、免疫系统健全的C57BL/6小鼠时，不会引发免疫排斥，能够成功形成肿瘤。这一特性使得MC38模型成为研究肿瘤免疫、评估免疫治疗(如免疫检查点抑制剂、癌症疫苗等)疗效的“金标准”工具之一。相较于另一常用细胞系CT26(源自BALB/c小鼠，由致癌病毒诱导)，MC38的肿瘤突变负荷较高，能表达更多的新抗原，从而更能模拟某些对免疫治疗敏感的人类结直肠癌特征。

MC38细胞系不同接种方式成瘤特性(仅供参考)

特性维度	皮下接种	腹腔内接种	卵巢囊膜下接种	尾静脉接种
接种部位	腋下或背部皮下	腹腔腔内	左侧/右侧卵巢包膜下	尾静脉
适宜接种密度	5×10⁶~1×10⁷细胞/只 (悬浮于100-200μLPBS/Matrigel混合液)	5×10⁶~1×10细胞/只 (悬浮于500μL PBS)	1×10⁵~5×10⁵细胞/侧卵巢 (悬浮于10-20μLPBS/Matrigel混合液)	2×10⁵~5×10⁵细胞/只 (悬浮于100-200μLPBS)
成瘤潜伏期	较短(通常2-4周)	中等(通常4-8周)	较长(通常6-12周)	变化大(肺部结节2-4周可检测)
主要肿瘤特性	形成单一的、局灶性实体瘤，易于体外测量。	形成多发性肿瘤结节，广泛分布于腹腔各器官表面(肠系膜、膈膜等),常伴恶性腹水。	在卵巢原位形成原发瘤，肿瘤微环境最真实，病理进展更接近自然过程。	细胞在肺部毛细血管着床，形成多发性肺部转移结节。
转移特性	极少发生转移。	高度转移性，主要为腹腔内种植性转移。	可发生转移，会从原发灶脱落并进行腹腔转移。	专门用于血行转移，主要靶向肺部转移。
技术难度	非常简单，技术门槛最低。	简单，操作类似常规腹腔注射。	难度高，需显微外科手术技术和熟练操作。	中等，需要熟练的尾静脉注射技术。
主要监测方式	1.游标卡尺测量 2.活体成像(BLI)	1.活体成像(BLI)(监测全身肿瘤负荷) 2.腹水量测量 3.解剖观察结节	1.活体成像(BLI)(精准定位卵巢原发灶) 2.解剖及组织学分析	1.活体成像(BLI)(定量肺部信号) 2.肺部组织学切片(计数结节)
核心应用方向	· 快速评估体内肿瘤增殖 · 药物初步筛选与疗效评价(给药方便)	· 晚期卵巢癌腹腔转移及腹水研究 · 评估药物对弥漫性病灶的效果	· 卵巢癌发生、发展及转移的自然病程与机制研究 · 肿瘤与微环境相互作用	· 卵巢癌血行性肺转移研究 · 评估药物抗远处转移功效

同类细胞系成瘤差异(仅供参考)

产品货号	IM-M006	IM-M007
特性	MC38	CT26
来源	C57BL/6小鼠，化学诱导(DMH)	BALB/c小鼠，化学诱导(N-nitroso-N-methylurethane)
遗传背景	同系(Syngeneic)C57BL/6小鼠	同系(Syngeneic)BALB/c小鼠
免疫环境	免疫健全，可用于免疫治疗研究	免疫健全，可用于免疫治疗研究
肿瘤突变负荷(TMB)	高	中
新抗原负荷	高，对免疫治疗(如抗PD-1/PD-L1)反应强烈	中，对免疫治疗有反应但较弱
皮下成瘤性	稳定，生长速度中等	稳定，生长速度较快
自发转移倾向	皮下模型低，原位模型可引发高频率肝转移	皮下模型低，转移模型需人工诱导
主要应用	免疫疗法评估(响应好)、机制研究、转移模型	通用肿瘤学、化疗/靶向治疗筛选、免疫治疗(需强效剂)
核心优势	高免疫原性，是检查点抑制剂研究的标杆模型	生长快速，在BALB/c背景上成瘤稳健

MC38成瘤关键影响因素

影响因素类别	具体因素	对成瘤的影响	优化策略
细胞本身状态	细胞代次	高代次细胞可能发生遗传漂变，致瘤性减弱或丧失。	使用低代次细胞(复苏后传代次数<10代)。建立主细胞库和工作细胞库，从冻存库中定期复苏，避免连续传代。
	细胞活力	活力低(<90%)的细胞接种后死亡比例高，可能导致不成瘤或成瘤延迟。	确保细胞处于对数生长期(约80-90%汇合度)时收取。胰酶消化时间不宜过长，复苏后培养至少一代再接种
	支原体污染	严重影响细胞状态和体内生长，导致实验失败，数据不可靠。	接种前务必进行支原体检测，确保细胞为阴性。从可靠来源购买并定期检测。
接种操作技术	细胞接种数量	数量过低可能导致不成瘤或成瘤慢；过高可能导致肿瘤生长过快，无法观察药物效应或导致中心坏死。	进行预实验确定最佳接种量。皮下成瘤常用范围：0.5-5×10^6/只(100-200 μL)。
	细胞悬液基质	使用PBS或无血清培养基接种容易在注射过程中发生泄漏，导致细胞实际接种量不足。	使用**Matrigel®(基质胶)或PBS与Matrigel的1:1混合液重悬细胞。Matrigel在低温下为液态，37℃会凝固，可有效将细胞包裹在注射部位。操作全程在冰上进行，防Matrigel提前凝固。
	接种部位	操作不当会导致细胞悬液泄漏出，或注射到皮下过浅位置(皮内),影响肿瘤生长	使用胰岛素syringe(针细，可减少泄漏)。采用斜刺方式注射，形成一个“隧道”后再注入细胞，注射后停留10秒再拔针，轻轻旋转针头后拔出。
	接种体积	体积过大(如>200μL)易导致泄漏和扩散；体积过小(如<50μL)细胞浓度过高，易堵塞针头	将体积控制在100-200μL之间，最常用100μL
实验动物因素	小鼠品系	MC38源于C57BL/6小鼠，必须使用免疫健全的C57BL/6小鼠。使用其他品系(如裸鼠)可能会被免疫系统排斥。	确认小鼠品系为C57BL/6。购买于有资质的生产商，并在本公司SPF级动物房适应至少3天。
	小鼠性别与周龄	此性小鼠可能比雄性更具攻击性。年龄过大(>12周)的小鼠免疫系统更成熟，可能抑制肿瘤生长。	通常使用6-8周龄的雌性C57BL/6小鼠，体重约18-20g。同一实验中使用相同性别和周龄的小鼠。
	小鼠健康状况	小鼠处于应激状态(如拥挤、噪音、疾病)会影响免疫状态，进而影响肿瘤生长	确保动物饲养环境舒适、安静(SPF级),遵循动物福利原则。
实验设计与监测	成瘤实验分组	分组不均(如体重、周龄差异大)会引入变量，导致组间差异大，结果不显著。	接种前随机分组，确保各组平均体重一致。
	肿瘤监测频率	测量不规律或方法不统一会导致生长曲线不准确。	从接种后第3-5天开始，使用游标卡尺每2-3天定期测量肿瘤体积。体积公式： V=(长×宽²)/2。
	动物福利终点	肿瘤过大或发生溃疡会引发动物疼痛和distress,违反伦理规定。	设定明确的人道终点(如肿瘤直径≤15-20mm,或体积≤2000mm³,或体重下降>20%),及时执行安乐死。