HCT-116/OX人结肠癌奥沙利铂耐药株（STR鉴定报告）

货号：IMD-025

规格：1×10⁶cells/T25瓶或1mL冻存管

形态：贴壁生长，上皮细胞样

培养基：DMEM+10% FBS+8ug/mL Oxaliplatin+1%PS

传代方法：1:2至1:3，每周 2-3次

培养环境：气相：95%空气+5%二氧化碳;温度：37℃

HCT116-OX人结肠癌细胞奥沙利铂耐药株说明书

价格：¥9600

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背景介绍培养操作冻存步骤售后服务

一、细胞基本属性
细胞名称	HCT-116/OX人结肠癌奥沙利铂耐药株（STR鉴定报告）
种属来源	人
组织来源	结肠癌
生长特性	贴壁生长
细胞形态	上皮细胞样
细胞代数	10代以内
细胞背景	1979年M.Brattain等从患结肠癌的48岁男性病人中分离的三株恶性细胞之一。在半固体琼脂糖培养基中形成克隆。HCT116在无胸腺的裸鼠有致瘤性，形成上皮样的肿瘤。在 ras 原癌基因的密码子 13 中具有突变，可用作该密码子突变的 PCR 检测的阳性对照。核型：干线染色体数接近二倍体，模态数为 45 (62%)，多倍体数为 6.8%。标记物 10q+ 和 t(?8p;18q) 存在于所有中期和 t(9q;?16p-)，存在于 80% 的核型细胞中。N16 在存在 t(9q;?16p-) 时是单体的，但在不存在 t(9q;?16p-) 时则是二体的。N10 和 N18 是单体的，上面提到的其他染色体是二体的。Q 带观察显示存在 Y 染色体，但并非在所有细胞中都存在(50% 的细胞在 G 带核型中缺乏 Y)。通过免疫过氧化物酶染色，细胞的角蛋白呈阳性。HCT 116 细胞的转化生长因子β1(TGFβ1)和β2(TGFβ2)表达呈阳性。
细胞规格	1×10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测	无
培养基	DMEM+10% FBS+8ug/mL Oxaliplatin+1%PS
培养条件	气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件	无血清冻存液，液氮储存
细胞货期	2周左右
发货方式	复苏发货（免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用）顺丰快递
供应限制	仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明	以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主
二、细胞培养操作
到货方式	活细胞（常温运输）
收货处理	1.收到细胞后，请检查发货培养瓶的状况，是否有破损、漏液、浑浊等现象。如果有，请立即和我们联系；如果没有，请您用75%酒精消毒细胞瓶外壁，再将其置于37度培养箱静置4h。 2.静置后观察细胞状态，在显微镜下确认细胞生长状态时，最好在低倍镜（4或5X物镜）下进行，能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20X物镜下，同时给刚收到的细胞拍照，（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。拍照反馈给我们。
传代密度	细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养
传代方法	1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2.加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 3.按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。 4.将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
到货方式	冻存细胞（干冰运输）
收货处理	1.干冰运输的细胞到货，请检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系。 2.为保证细胞的高存活率，收到产品后，请立即解冻复苏细胞，如若不能复苏请立即转入液氮冻存。
培养皿/瓶	一管细胞建议接种到6cm培养皿或者T25瓶
复苏操作	1.将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。 2.在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。 3.然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜）。 4.第二天换液并检查细胞密度。
注意事项	1.运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 2.因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 3. 申请售后时请提供细胞收货时及反馈售后当天细胞清晰照片及培养信息，建议客户在细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。 4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。 5. 细胞在不同实验室培养由于所使用培养基及血清品牌、个人操作习惯、培养瓶品牌等诸多培养条件不尽相同，导致细胞培养形态、生长速度、贴壁情况均可能有所差异，对于此类细胞适应环境生长的行为，不予过度解释或免费售后。
三、细胞冻存操作
冻存液配方	无血清冻存液，液氮储存
冻存密度	如果是有要求每管要冻多少细胞，那就用1ml完培重悬后，取部分按平时方法计数，剩下的细胞按计数需要的细胞量冻存即可。如果没要求，那就按平时，一个皿冻一管。
冻存方法	待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例 1.收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，加1 mL血清重悬细胞，进行细胞计数。 2.根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x10⁶~1x10⁷/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。 3.将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项	冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案

科研细胞购买常见问题

问：为什么官网的培养条件和我看的文献里细胞培养条件不一样呢？

答：部分细胞是会出现多种培养条件，我们公司优先选择引种来源的培养条件以及建系者所用培养条件，出现差异的原因是不同实验室在保藏过程中更改了细胞的培养条件，为了避免细胞突然更换培养条件后不适应，建议老师使用厂家推荐的培养条件培养。

问：冻存细胞运输与常温细胞运输相比有什么区别？

答：细胞株发货有常温或者冻存两种形式，常温细胞货期一般一周左右，复苏活细胞一个T25瓶发货；冻存细胞有库存的话，一般当天或者隔天可以发货，细胞系冻存细胞担心客户复苏不成功所以赠送了一管，实际发货2管；原代冻存细胞发货1管，冻存细胞发货是10公斤干冰及顺丰运输，所以冻存细胞需额外支付干冰及运输费200元。

问：培养细胞的培养瓶可以重复利用吗？

答：一般不建议重复利用，特别是贴壁不牢固细胞，重复利用会导致吸附性变差，漂浮增多;一个T25瓶建议使用最多不超过3次，其次需要注意无菌操作，避免污染。

问：运输细胞用的培养基可以回收使用吗?

答：不能回收使用的，运输用的培养基(灌液培养基)营养在路上已经消耗得差不多，所以收到细胞之后，培养箱静置4-6h之后，请及时按照说明书细胞培养条件更换新鲜培养液培养。

问：冻存的细胞出现颜色不一致，有的红有的粉，对复苏会有影响吗？

答：这种情况容易在不同冻存批次间出现，与冻存细胞的密度、冻存液配方、温度导致pH变化等有关，偶尔有遇到这种情况，不是绝对性对细胞状态有影响，可以复苏看下。

问：不同引种单位的同一株细胞，RRID都是一样的吗？

答：是的，同一个细胞系只有一个RRID。