第一节:复苏细胞收货处理教程

本视频为厦门逸漠生物科技有限公司出品关于复苏细胞到货如何处理，我们对每一步操作都做了演示，以便实验者更好地理解常温运输细胞转移实验过程。

细胞收货处理(T25瓶)

实验准备

提前开启紫外照射30min消毒灭菌，工作台开灯通风10min，用75%酒精擦拭台面

所需试剂物品

完全培养基、胰酶、PBS

到货处理

1.在细胞间拆封包裹，阅读细胞说明书和检测报告

2.取出T25瓶，检查是否在运输过程中破损，在显微镜下镜检并拍照存档

3.放入培养箱稳定细胞状态，约2-4小时

4.2-4小时后拿出T25细胞瓶，显微镜下观察细胞状态，细胞状态稳定密度85%以上，即进行细胞转移步骤

细胞迁移步骤

第一步：吸出运输用培养基，加入5m」1xPBS清洗1遍，去掉PBS，加入2m1胰酶消化，并放入培养箱孵育1-2min

第二步：在显微镜下观察细胞是否脱落，加入3mI完全培养基终止消化，轻轻吹打细胞，使其脱离瓶壁

第三步：细胞悬液转移到15ml离心管中，1000rpm离心5min

第四步：拿出一个新的10cm培养皿，加入8-10ml完 全培养基，在皿上标记细胞名称，培养基名称，日期

第五步：离心结束后，用75%的酒精喷管身后，放回工作台中，去上清，加入1m]完全培养基，重悬后加到10cm培养皿中，放入37℃培养箱培养

注意事项

1.收到细胞后，首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系

2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照)，记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态

3.由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决

4.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致