第三节:人脐静脉内皮细胞原代分离,鉴定及培养
人脐静脉内皮细胞原代分离,鉴定及培养:1.将 15-20 cm 长的新生儿脐带放入无菌的 PBS 溶液(添加双抗和肝素钠)中储存(注:4℃下最多贮存 24 小时,室温下不超过 6 小时,否则废弃);细胞鉴定;人脐静脉内皮细胞贴壁生长,呈短······
发布时间:2020-05-11 16:34:12 细胞资源库平台
本视频为厦门逸漠生物科技有限公司出品关于贴壁细胞复苏步骤操作指南,我们对每一步操作都做了演示,以便实验者更好地理解贴壁细胞复苏实验过程。
提前打开水浴锅设置37C,提前开启紫外照射30min消毒灭菌,工作台开灯通风10min,用75%酒精擦拭台面
贴壁细胞复苏所需试剂物品
细胞培养液,胰酶,PBS,培养皿等
第一步:从液氮罐中迅速取出冻存管,立即放入37°C水浴箱中;
第二步:轻轻摇晃,使细胞快速融化解冻,最好在1min内完成;
第三步:将冻存管移入离心机中1000rpm离心3min;
第四步:取4mL完全培养基到一个新的6cm培养皿中,在培养皿上标记细胞名称,日期和所用培养基名称;
第五步:离心结束后,以75%酒精喷冻存管外部,移入无菌操作台内;
第六步:从冻存管中吸走上清,用1ml完全培养基重悬后,移入6cm皿中;
第七步:“8字法”摇匀后,镜检是否铺匀;
第八步:把培养皿放入C02培养箱中培养,第二天观察贴壁情况。
人脐静脉内皮细胞原代分离,鉴定及培养:1.将 15-20 cm 长的新生儿脐带放入无菌的 PBS 溶液(添加双抗和肝素钠)中储存(注:4℃下最多贮存 24 小时,室温下不超过 6 小时,否则废弃);细胞鉴定;人脐静脉内皮细胞贴壁生长,呈短······
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