第二节:冻存细胞收货处理教程

本视频为厦门逸漠生物科技有限公司出品关于冻存细胞收货如何处理，我们对每一步操作都做了演示，以便实验者在收到细胞后，能正确地处理和复苏。

冻存细胞复苏实验准备

细胞培养基、6cm培养皿、10cm培养皿、酒精、紫外照射30min消毒灭菌

冻存细胞到货处理

1.提前打开水浴锅设置37C

2.在细胞间拆封包裹，取出冻存细胞

3.检查管身是否在运输过程中破损，内容物是否熔化，阅读细胞说明书和检查检测报告

冻存细胞复苏步骤

第一步：将取出的冻存管迅速放入37C水浴锅中，轻轻摇晃，使细胞快速融化解冻，最好在1min内完成

第二步：将冻存管移入离心机中1000rpm离心3min

第三步：取3mL完全培养基到一个新的6cm培养皿中，在培养皿上标记细胞名称，日期和所用培养基名称

第四步：拿出一个新的10cm培养皿，加入8-10ml完 全培养基，在皿上标记细胞名称，培养基名称，日期

第五步：离心后，以75%酒精喷冻存管外部，移入无菌操作台内，从冻存管中吸走上清，用1ml完全培养基重后，移入6cm中，“8字法 ”摇匀，镜检是否铺匀，把培养皿放入C02培养箱中培养，第二天观察贴壁情况

注意事项

1.操作冻存细胞时应使用手套、工作服和防护面具等，以避免事故的发生；

2.复苏细胞时，应保持管盖拧紧，将管盖以下部分浸入37℃水浴中解冻，解冻过程要快；

3.部分比较脆弱的细胞可不用离心，直接用培养基稀释细胞悬液后进行培养，但要及时通过换液等方式除去含DMSO的细胞冻存液；

4.请参照细胞说明书推荐的培养基和操作方法来培养细胞。