HCC-LM3人高转移性肝癌细胞皮下成瘤验证

发布时间：2025-10-17 09:00:38 细胞资源库平台访问量：38

人肝细胞癌(HCC) 是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率长期居高不下，尤其在亚洲和非洲部分地区负担沉重(全球每年新发病例超90万，死亡病例超80万，其中中国贡献近半)。其发生发展是一个复杂的多步骤过程，通常与慢性肝病(如乙型/丙型肝炎病毒感染、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝炎)导致的持续肝损伤、再生和纤维化(肝硬化)密切相关。常见的风险因素还包括黄曲霉素暴露、代谢综合征等。尽管在诊断(如影像学、血清标志物AFP)和治疗(手术切除、肝移植、局部消融、靶向治疗、免疫治疗)方面取得了一定进展，HCC患者仍普遍面临早期诊断困难、肿瘤异质性强、易复发转移、易产生治疗耐药等严峻挑战，导致其总体预后不良(5年生存率仍较低)。因此，深入解析HCC的发病机制、肿瘤微环境特征、耐药机制以及寻找新的有效治疗靶点，是当前基础和临床研究的迫切需求。在此背景下，构建能够忠实模拟人类HCC生物学特性(包括肿瘤发生、进展、侵袭转移及微环境互作)的体内外成瘤模型(如细胞系移植模型、基因工程小鼠模型、患者来源异种移植模型等)具有至关重要的意义。这些模型为研究HCC的分子机制提供了可控且可操作的平台，是评估潜在抗癌药物(化疗药、靶向药、免疫治疗药)有效性、安全性及耐药性的关键临床前工具，也是探索新型治疗策略(如联合疗法)不可或缺的桥梁。没有可靠且具有临床相关性的成瘤模型，HCC的基础研究将难以深入，新药研发也将步履维艰。构建和优化更精准、更能反映人HCC复杂性和异质性的模型，是推动肝癌研究取得突破性进展、最终改善患者预后的基石。

细胞简介

细胞名称：HCC-LM3人高转移性肝癌细胞

种属来源：人

组织来源：肝脏

生长特性：贴壁生长

细胞形态：上皮细胞样

背景介绍：HCC-LM3是一种具有高转移潜能的人肝细胞癌(HCC)细胞系，其起源可追溯至著名的中国科学院上海细胞生物学研究所。该细胞系于本世纪初通过严格的体内筛选过程建立而成：研究人员将源自一位中国男性患者的原发性肝癌细胞系MHCC97-H(本身已具有中度转移性)接种于裸鼠体内，随后从形成的肺转移灶中分离出具有更强侵袭和转移能力的细胞亚群，经过多次这样的循环筛选(体内传代)，最终成功克隆并鉴定了这株超高转移性的HCC-LM3细胞。其最显著的生物学背景特征在于其卓越的转移能力，尤其是倾向于向肺部转移，这使其迅速成为肝癌转移机制研究、抗肿瘤药物筛选及新型治疗策略评估领域中一个至关重要且广泛使用的临床前实验工具模型。

HCC-LM3细胞在小鼠体内的成瘤特性总结(仅供参考)

接种方式	操作简介	成瘤特性与模型特点	适宜接种密度(细胞数/只)	注意事项与应用场景
皮下异种移植	将细胞悬液注射到免疫缺陷小鼠(如裸鼠或NSG小鼠)的背部或腋下皮下。	成瘤率高(接近100%),成瘤时间短(通常1-2周可触及瘤块)。肿瘤生长稳定，易于用游标卡尺测量和计算体积。自发转移率较低，主要用于评估肿瘤增殖和局部生长。	5×10⁶~1×10⁷	优点：操作简单，肿瘤易观测，荷瘤鼠存活时间长。缺点：微环境不真实，转移潜能受限。适用：初步药效评估、肿瘤增殖研究、保种。
原位肝内移植	通过手术暴露小鼠肝脏，将细胞悬液直接注射入肝左叶或中叶。	成瘤率较高(>90%),需经验技术。模拟了人肝癌的真实微环境，病理特性更接近临床。高自发转移率，可形成肝内播散和远处转移(尤其肺转移)。	1×10⁶~5×10⁶	优点：模型临床相关性高，能有效评估侵袭和转移。缺点：手术操作复杂，技术要求高，需通过成像(小动物超声、活体成像)监测肿瘤生长。适用：肝癌转移机制、侵袭转移药物评价、肿瘤微环境研究。
尾静脉注射	将细胞悬液通过尾静脉注入循环系统。	不形成原位瘤，主要评估细胞的转移定植能力。细胞会主要滞留于肺部，形成明显的肺转移结节。是建立实验性转移模型的经典方法。	5×10⁵~2×10⁶	优点：操作相对简单，能特异性、高效地研究肺转移环节。缺点：bypass了侵袭和内渗步骤，不能模拟转移全过程。适用：专注于循环肿瘤细胞肺定植和克隆形成能力的研究。
脾内注射	通过手术或超声引导将细胞注射入脾脏，模拟经门静脉的肝转移途径。	通过手术或超声引导将细胞注射入脾脏，模拟经门静脉的肝转移途径。	5×10⁵~1×10⁶	优点：能建立多发性肝转移瘤模型，效率高于原位接种。缺点：操作有难度，可能存在脾脏原位生长。

模型选择：

● 若研究原发性肿瘤生长和对化疗药物的反应，皮下模型是首选。

● 若研究肝癌的自然转移过程(包括侵袭、渗漏、定植)，原位肝内模型是金标准，最能反映HCCLM3的高转移特性。

● 若专注于转移的后期步骤(如远处器官定植)，尾静脉注射模型更直接、高效。

肝癌细胞系成瘤特性差异对比(仅供参考)

产品货号	细胞系	起源/背景	皮下成瘤性&生长速度	自发转移能力(原位接种后)	实验性转移能力(尾静脉注射后)	主要特点与应用
IM-H037	HCC-LM3	高转移克隆，源自MHCC97-H	+++ 成瘤率~100%,生长快	++++ 超高转移，肺转移率极高	++++ 高效形成肺转移灶能形成肺转移	研究肝癌转移的“金标准”模型，专用于侵袭、转移及抗转移治疗研究。
IM-H045	MHCC97-H	HCCLM3的亲本细胞系，中度转移	+++ 成瘤率~100%,生长快	+++ 中度转移，可发生肺转移	+++ 能形成肺转移	作为HCCLM3的对照，用于研究不同转移潜能细胞的差异。
IM-H038	HepG2	儿童肝肿瘤，分化较好	+ 成瘤率不定，生长极慢	- 几乎无自发转移	- 几乎无实验性转移	主要用于肝细胞代谢、病毒肝炎及毒性研究，不适用于转移研究。
IM-H040	Huh7	高分化肝癌，常用于病毒研究	++ 成瘤率较高，生长较慢	+/- 极低或无自发转移	+ 很弱	广泛应用于HCV病毒复制、肝细胞生物学及药物筛选,转移模型不适用。
IM-H047	SMMC-7721	中国患者来源，中度分化	++ 成瘤率较高，生长中等	+ 低转移，偶有报告	++ 具有一定能力	是一种常用的、特性介于中间的肝癌研究模型，适用于一般性肿瘤学研究。

HCC-LM3细胞成瘤关键影响因素

影响因素	问题表现	优化策略
细胞状态
· 传代次数过高	转移能力丧失(>P10后肺转移率↓50%)	使用低传代细胞(P3-P5);冻存早期批次(液氮保存)
· 支原体污染	成瘤延迟/失败，免疫激活	采购时要求检测报告；定期PCR监测；用支原体清除剂处理污染细胞
接种操作
· 细胞悬液聚集	栓塞导致局部坏死	悬液过40μm滤网；使用含0.1%BSA的冷PBS
· 原位注射泄漏	腹腔播散干扰结果	显微外科技术；注射后按压针孔10秒；限制注射体积(肝内≤20μL)
动物模型
· 鼠龄>8周	自发免疫力增强抑制成瘤	选用4-6周龄免疫缺陷鼠(BALB/c nude或NSG)
· 品系不符	C57BL/6等免疫健全鼠排斥细胞	仅用免疫缺陷鼠；避免NOD/SCID鼠(易发淋巴瘤)
微环境支持
· 无基质胶辅助	皮下成瘤率↓30%,转移能力丧失	混合Matrige(1:1)(4℃操作防凝固)
· 营养支持不足	瘤体生长缓慢	术后补充高脂饲料(含10%脂肪);水中添加抗生素(Enrofloxacin)防感染
术后管理
· 未监测转移	低估真实转移率	定期活体成像(Luc标记细胞);第6/8周解剖查肺结节
· 肿瘤体积过大	中心坏死干扰药效评估	皮下瘤≤1500mm³时开始实验；原位瘤直径≥10mm需终止