PAN02-OVA小鼠胰腺癌细胞-OVA转染皮下成瘤验证

发布时间：2025-07-25 08:59:37 细胞资源库平台访问量：830

构建稳定表达卵清蛋白(OVA)的小鼠胰腺癌细胞模型(如Panc02-OVA)，在肿瘤免疫学基础研究与新型疗法开发中具有不可替代的核心价值。其重要性主要体现在以下几个方面：首先，OVA作为一种高度免疫原性的模型抗原，其特异性T细胞表位(如H-2Kb限制性的SIINFEKL肽)已被充分表征，并拥有对应的转基因T细胞受体(如OT-I CD8⁺ T细胞)。将OVA转染至胰腺癌细胞，为研究者提供了一个高度可控且可精确追踪的平台，能够实时、定量地研究肿瘤抗原特异性CD8⁺ T细胞在胰腺癌复杂微环境中的活化、浸润、功能发挥、耗竭动态及免疫逃逸机制。其次，胰腺癌因其高度免疫抑制性的微环境和对传统疗法(包括免疫检查点抑制剂)的普遍抵抗而闻名。OVA-Panc02模型结合免疫健全小鼠，为深入剖析胰腺癌特有的免疫抑制机制(如髓系来源抑制细胞、调节性T细胞的作用)以及评估旨在克服这些障碍的新型免疫治疗策略(如过继性T细胞疗法、癌症疫苗、联合免疫疗法等)的疗效和机制，提供了强有力的临床前工具。该模型能够精确量化治疗诱导的抗原特异性抗肿瘤免疫反应，显著加速了从基础发现向潜在临床转化的进程。因此，构建并利用这种工程化的胰腺癌-OVA模型，是推动胰腺癌免疫学认知和开发更有效免疫治疗方案的关键基石。

细胞简介

细胞名称：PAN02-OVA小鼠胰腺癌细胞-OVA转染

种属来源：小鼠

组织来源：胰腺

生长特性：贴壁生长

细胞形态：多角细胞样

背景介绍：PAN02-OVA细胞是一种广泛应用于肿瘤免疫学研究的工程化小鼠胰腺导管腺癌细胞模型。其基础细胞系PAN02(或Panc02)源自化学致癌剂(如DMBA)诱导的C57BL/6小鼠原发性胰腺导管腺癌，具有高度的同系移植性，能在免疫健全的C57BL/6小鼠中形成肿瘤，并能部分模拟胰腺癌的免疫抑制微环境特征。为了在高度可控的条件下研究抗原特异性T细胞免疫应答，研究人员通过基因工程手段(如慢病毒转导或逆转录病毒感染)将模型抗原卵清蛋白(OVA) 的基因稳定整合到PAN02细胞基因组中，从而构建出PAN02-OVA细胞系。该细胞系能够持续表达OVA蛋白，并通过主要组织相容性复合物I类分子(H-2Kb)将其免疫显性表位肽SIINFEKL呈递在细胞表面。这使得PAN02-OVA细胞能够被携带特异性T细胞受体(TCR)的OT-I CD8+T细胞(转基因T细胞，其TCR识别H-2Kb/SIINFEKL复合物)高效识别和杀伤。因此，PAN02-OVA模型成为了一个极其强大且标准化的平台，专门用于在胰腺癌背景下深入研究T细胞的活化、浸润、功能耗竭、免疫检查点作用、肿瘤免疫逃逸机制，以及评估基于T细胞(如过继性T细胞疗法、免疫检查点阻断剂、癌症疫苗等)的新型免疫治疗策略的疗效和作用机制。其核心价值在于提供了明确且可追踪的抗原-特异性T细胞相互作用，大大增强了实验的可控性和结果解读的精确性。

注意事项：

该细胞puro药筛浓度为1.0ug/ml，培养过程中建议使用0.5ug/ml puro维持。

PAN02-OVA细胞在小鼠体内的成瘤特性总结(仅供参考)

接种方式	推荐接种密度	成瘤潜伏期	肿瘤生长速度	病理特征	适用研究方向	操作难点
皮下注射	5×10⁵-1×10⁶细胞/鼠	5-7天(肉眼可见 )	中等：体积达500mm³约需14-21天	边界清晰，包膜完整；免疫细胞浸润较少	基础肿瘤生长、药物筛选、免疫治疗初评	低(操作简单)
胰腺原位注射	1×10⁵-5×10⁵细胞/鼠	10-14天(可触及 )	缓慢：体积达100mm³需21-28天	模拟人类胰腺癌：局部侵袭、纤维化微环境；高免疫抑制(MDSC/Treg浸润 )	转移机制、肿瘤微环境、免疫治疗深度评估	高(需开腹手术/超声引导)
脾内注射	2×10⁵-5×10⁵细胞/鼠	肝转移灶：14-21天	转移灶生长快：肝占位3周内形成	肝转移主导：伴胰腺原发灶；高血管生成活性	肝癌转移机制、抗转移药物评价	中(需精准脾内注射 )
尾静脉注射	2×10⁶-5×10⁶细胞/鼠	肺转移：21-28天	肺结节生长缓慢	多发性肺转移；罕见胰腺定位	血行转移模型、循环肿瘤细胞研究	低(但成瘤率不稳定 )

胰腺癌细胞系成瘤特性差异对比(仅供参考)

产品货号	细胞系	来源/修饰	成瘤时间	生长速度	转移性	免疫原性	适用研究
IMO-008	PAN02-OVA	C57BL/6小鼠胰腺癌+OVA转染	7-14天	中等	低	高(可控抗原)	抗原特异性免疫治疗
IM-M092	PAN02	C57BL/6小鼠化学诱导	7-14天	中等	低	低	基础肿瘤生长、化疗筛选
IM-M167	KPC	KPC转基因小鼠(Kras/p53突变 )	5-10天	快	高	中	自发成瘤、转移模型、免疫编辑
-	Panc02-H7	PAN02过表达HER2/neu	7天	快	中	中	HER2靶向治疗
IMO-019	MC38-OVA	C57BL/6结肠癌+OVA转染	5-7天	快	低	高	通用抗原特异性模型(非胰腺特化)

PAN02-OVA细胞成瘤关键影响因素

影响因素	作用机制	问题表现	优化策略
细胞状态
· 细胞代次	高代次(>15)基因不稳定，OVA表达下降	成瘤延迟/失败， T细胞活化减弱	使用<10代细胞；冻存早期批次，定期回传验证OVA表达
· 细胞活力	活力<90%导致接种后凋亡	肿瘤起始率低	胰酶消化时间≤2min; 重悬于冰上预PBS+10%FBS; 接种前Trypan Blue确认>95%活力
接种操作
· 接种密度	密度不足无法克服免疫清除；过高致缺氧坏死	皮下：不成瘤或生长停滞原位：腹膜炎	皮下：5×10⁵-1×106/鼠原位：1×10⁵-2×105/鼠(+Matrigel®)
· 基质胶比例	未添加胶体时细胞腹腔扩散	原位成瘤率<50%	Matrigel:PBS=1:1混合(终浓度≥5mg/mL)
宿主因素
· 小鼠性别与周龄	雄性激素促进肿瘤生长；老龄鼠免疫力下降	雌鼠成瘤慢，个体差异大	选用6-8周龄雄性C57BL/6(避免>12周龄 )
· 免疫状态	免疫缺陷鼠缺乏T细胞应答	丧失抗原特异性研究价值	仅用免疫健全鼠； SPF环境避免感染干扰
微环境调控
· 预处理化疗	吉西他滨清除MDSC,缓解免疫抑制	免疫治疗响应率低	接种前3天腹腔注射吉西他滨(100mg/kg)
· 辅助性细胞因子	IL-2维持T细胞活性， GM-CSF增强APC功能	T细胞浸润不足	瘤周注射IL-2(1μg/day)或表达GM-CSF的慢病毒
监测与干预
· 肿瘤体积测量	皮下模型卡尺测量误差>15%	药效评估失真	超声监测原位瘤；皮下瘤用3D成像(如IVIS)"
· 早期免疫干预时机	肿瘤>100mm³后T细胞耗竭不可逆	免疫治疗无效	在肿瘤可触及时(5-7天)启动治疗