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MHCC97H人高转移性肝癌细胞皮下成瘤验证

发布时间:2025-07-18 08:59:32 细胞资源库平台 访问量:101

人肝细胞癌(HCC) 是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率长期居高不下,尤其在亚洲和非洲部分地区负担沉重(全球每年新发病例超90万,死亡病例超80万,其中中国贡献近半)。其发生发展是一个复杂的多步骤过程,通常与慢性肝病(如乙型/丙型肝炎病毒感染、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝炎)导致的持续肝损伤、再生和纤维化(肝硬化)密切相关。常见的风险因素还包括黄曲霉素暴露、代谢综合征等。尽管在诊断(如影像学、血清标志物AFP)和治疗(手术切除、肝移植、局部消融、靶向治疗、免疫治疗)方面取得了一定进展,HCC患者仍普遍面临早期诊断困难、肿瘤异质性强、易复发转移、易产生治疗耐药等严峻挑战,导致其总体预后不良(5年生存率仍较低)。 因此,深入解析HCC的发病机制、肿瘤微环境特征、耐药机制以及寻找新的有效治疗靶点,是当前基础和临床研究的迫切需求。在此背景下,构建能够忠实模拟人类HCC生物学特性(包括肿瘤发生、进展、侵袭转移及微环境互作)的体内外成瘤模型(如细胞系移植模型、基因工程小鼠模型、患者来源异种移植模型等)具有至关重要的意义。 这些模型为研究HCC的分子机制提供了可控且可操作的平台,是评估潜在抗癌药物(化疗药、靶向药、免疫治疗药)有效性、安全性及耐药性的关键临床前工具,也是探索新型治疗策略(如联合疗法)不可或缺的桥梁。没有可靠且具有临床相关性的成瘤模型,HCC的基础研究将难以深入,新药研发也将步履维艰。 构建和优化更精准、更能反映人HCC复杂性和异质性的模型,是推动肝癌研究取得突破性进展、最终改善患者预后的基石。

细胞简介

细胞名称:MHCC97H人高转移性肝癌细胞

种属来源:人

组织来源:肝脏

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

背景介绍:MHCC97H是一种具有高转移潜能的人肝癌细胞系。它起源于其母系细胞MHCC97,而MHCC97本身是由中国上海复旦大学肝癌研究所(复旦大学附属中山医院肝癌研究所) 的科研团队于1996年,从一名中国男性肝细胞癌(HCC)患者的手术切除原发肿瘤组织中分离并建立的。为了研究肝癌转移的异质性,研究人员将MHCC97细胞通过皮下接种到裸鼠体内,并从中筛选出发生肺转移的病灶。随后,利用有限稀释法对具有肺转移能力的细胞进行亚克隆,最终成功分离出两个具有不同转移潜能的亚系:其中转移能力强的亚系被命名为MHCC97H(‘H’代表 High metastatic potential),而转移能力弱的亚系则被命名为MHCC97L(‘L’代表 Low metastatic potential)。因此,MHCC97H是经过体内筛选和亚克隆过程,从人原发性肝癌组织直接建立的MHCC97细胞系中衍生出来的、具有明确高转移特性的重要肝癌研究模型细胞。

MHCC97H细胞在小鼠体内的成瘤特性总结(仅供参考)

接种方式适宜接种密度成瘤时间成瘤率转移特性操作要点适用研究
皮下接种5×10⁶-1×107 cells/鼠4-5周(瘤体积500-1000mm³)~100%极低转移(<5%肺转移)双侧腋下或背部注射,100μL PBS/Matrigel悬液药物初筛、增殖研究
原位肝内接种2×10⁶-5×10⁶ cells/鼠2-3周(肉眼可见瘤结节 )95-100%高转移(肺转移率80-100%6-8周)开腹暴露左肝叶,25-30G针注入10-20μL悬液,按压止血转移机制、侵袭性研究
尾静脉注射1×10⁶-2×106 cells/鼠N/AN/A定向肺转移(3周内形成肺结节 )直接注入尾静脉,100-200μLPBS悬液循环肿瘤细胞、转移定植研究
脾内接种5×10⁵-1×106 cells/鼠4周>90%肝定向转移(肝内播散为主)脾脏中极注射,50 μL悬液,术后切除脾脏防原位成瘤肝特异性转移、微环境互作

肝癌细胞系成瘤特性差异对比(仅供参考)

产品货号细胞系物种来源宿主要求成瘤时间成瘤率转移能力适用研究领域主要局限性
IM-M003H22小鼠免疫健全鼠3-5天>95%低-中度化疗/免疫/中药药效学种属差异(非人源 )
IM-M073Hepa1-6小鼠免疫健全鼠7-10天>90%免疫治疗、基因工程模型验证 生长较缓慢
IM-H038HepG2免疫缺陷鼠14-21天70-80%极低药物代谢、基础机制研究难成瘤,需使用重度免疫缺陷鼠
IM-H040Huh7免疫缺陷鼠10-14天80-90%中度病毒性肝癌研究、靶向治疗需免疫缺陷鼠(成本高)
IM-H047SMMC-7721免疫缺陷鼠14-20天60-70%药物筛选、侵袭机制成瘤率不稳定

MHCC97H细胞成瘤关键影响因素略

影响因素问题表现优化策略
细胞状态
· 传代次数过高转移能力丧失(>P10后肺转移率↓50%)使用低传代细胞(P3-P5);冻存早期批次(液氮保存)
· 支原体污染成瘤延迟/失败,免疫激活采购时要求检测报告;定期PCR监测;用PlasmocinT处理污染细胞
接种操作
· 细胞悬液聚集栓塞导致局部坏死悬液过40μm滤网;使用含0.1%BSA的冷PBS
· 原位注射泄漏腹腔播散干扰结果显微外科技术;注射后按压针孔10秒;限制注射体积(肝内≤20μL)
动物模型
· 鼠龄>8周自发免疫力增强抑制成瘤选用4-6周龄免疫缺陷鼠(BALB/cnude或NSG)
· 品系不符C57BL/6等免疫健全鼠排斥细胞仅用免疫缺陷鼠;避免NOD/SCID鼠(易发淋巴瘤)
微环境支持
· 无基质胶辅助皮下成瘤率↓30%,转移能力丧失混合Matrige(1:1)(4℃操作防凝固 )
· 营养支持不足瘤体生长缓慢术后补充高脂饲料(含10%脂肪);水中添加抗生素(Enrofloxacin)防感染
术后管理
· 未监测转移低估真实转移率定期活体成像(Luc标记细胞);第6/8周解剖查肺结节
· 肿瘤体积过大中心坏死干扰药效评估皮下瘤≤1500mm³时开始实验;原位瘤直径≥10mm需终止

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