SCC7-NLUC-puro小鼠头颈鳞癌细胞系皮下成瘤验证

发布时间：2025-07-14 16:15:13 细胞资源库平台访问量：127

头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)是源于口腔、咽部、喉部等部位粘膜上皮的常见恶性肿瘤，全球发病率和死亡率居高不下，主要风险因素包括吸烟、饮酒、人乳头瘤病毒(HPV)感染等。尽管手术、放疗、化疗和新兴的免疫治疗(如PD-1抑制剂)取得进展，患者仍常面临治疗抵抗、局部复发、远处转移及严重治疗副作用等挑战，5年生存率改善有限。深入理解其复杂的肿瘤发生机制、肿瘤微环境(TME)相互作用及耐药性，对于开发更有效的诊疗策略至关重要。在此背景下，小鼠头颈鳞癌成瘤模型扮演着不可替代的关键角色。这些模型(如同源移植、异种移植、基因工程模型及人源化模型)能够在可控的体内环境中高度模拟人类HNSCC的生物学特性、进展过程及与免疫系统的动态互作。它们不仅是剖析驱动基因、信号通路、免疫逃逸机制的基础研究利器，更是筛选和评价新型靶向药物、免疫疗法、联合治疗策略以及放疗增敏剂的核心临床前平台。此外，患者来源异种移植(PDX)模型保留了原发肿瘤的异质性和微环境特征，为个体化精准医疗和预测性生物标志物研究提供了宝贵资源。因此，建立和应用可靠的小鼠HNSCC成瘤模型，是加速基础发现向临床转化、最终改善患者预后的核心驱动力。

细胞简介

细胞名称：SCC7-NLUC-puro小鼠头颈鳞癌细胞(NLUC标记)

种属来源：小鼠

组织来源：皮肤

生长特性：贴壁生长

细胞形态：上皮细胞样

背景介绍：Luciferase SCC7细胞稳定表达萤火虫荧光素酶。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照，也可用于活体动物成像实验。该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。其亲本株SCC7细胞是一种小鼠源性的鳞状细胞癌细胞系。它于1983年由Herman D. Suit及其同事从一只老年雌性C3H/HeJ小鼠的自发性口腔鳞状细胞癌(具体发生在舌腹侧)中分离并建立。值得注意的是，SCC7来源于一个同系(syngeneic) 的小鼠品系(C3H/HeJ)，这意味着当将其移植回相同遗传背景(即免疫系统完整的C3H/HeJ或相关亚系如C3H/HeN)的小鼠体内时，不会被排斥。这个特性使得SCC7细胞成为研究头颈部鳞癌(HNSCC)，特别是免疫系统完整背景下肿瘤生长、转移、治疗反应(如放疗、化疗、免疫治疗)以及肿瘤微环境相互作用的重要且广泛使用的同源移植模型。

puro药筛浓度：

SCC7-NLUC-puro细胞puro药筛浓度为1.0ug/ml，培养过程中建议使用0.5ug/ml puro维持

培养须知：

首次复苏或长期未用嘌呤霉素时，建议用含嘌呤霉素的培养基培养24-48小时以清除非抗性细胞。建议定期备份低代次细胞，并记录荧光素酶活性数据以确保实验一致性。如有特殊需求(如无血清培养)，需逐步驯化并验证基因稳定性。双标记(NLUC+Puro)确保长期基因稳定性，但需持续筛选压力。

SCC7-NLUC-puro细胞系不同接种方式成瘤特性(仅供参考)

接种方式	操作要点	细胞量	成瘤周期	头颈鳞癌研究优势	皮下移植
皮下移植	背部/后肢皮下注射，基质胶混合提升效率	1×10⁶～5×10⁶	5~14天	快速评估药物疗效、放疗敏感性、生长动力学	微环境非生理性，转移率低
原位口腔移植	舌/颊黏膜显微注射，需麻醉及立体定位	5×10⁴~2×10⁵	7~21天	模拟临床TME、局部侵袭、淋巴结转移模型	操作复杂，易出血，需活体成像监测 (BLI)
淋巴结内注射	颌下/颈淋巴结直接注射，超声引导	1×10⁵～3×10⁵	3~10天	淋巴结转移机制、免疫逃逸研究	技术要求高，易损伤淋巴管
尾静脉注射	尾静脉输注，细胞悬浮于PBS	1×10⁵～5×10⁵	肺转移14~28天	血行转移(肺/肝/骨)、循环肿瘤细胞研究	血行转移(肺/肝/骨)、循环肿瘤细胞研究
肌肉内注射	咬肌/颞肌内精准注射	2×10⁵～5×10⁵	10~18天	模拟深层浸润、神经侵袭行为	生长速度较慢，解剖结构复杂

SCC7与同类头颈鳞癌细胞系成瘤特性对比(仅供参考)

产品货号	细胞系	物种/品系	免疫背景	成瘤率	转移能力	治疗研究适用性	局限性
IM-M102	SCC7	小鼠/C3H	免疫健全	>95%	+++(淋巴结/肺)	免疫治疗、放疗、联合疗法	仅适用C3H小鼠
IM-M150	MOC1	小鼠/C57BL/6	免疫健全	>90%	+(低转移)	免疫检查点抑制剂机制研究	生长缓慢，转移模型难建立
-	MOC22	小鼠/C57BL/6	免疫健全	>85%	++(中度淋巴结转移 )	化疗耐药研究	异质性高
IM-H140	Cal27	人源(舌鳞癌)	免疫缺陷	>90%	+(需高细胞量)	靶向药物筛选	微环境失真，无免疫互作
IM-H493	FaDu	人源(咽鳞癌)	免疫缺陷	>85%	-(几乎无自发转移 )	放疗敏感性研究	转移模型需人工干预(尾静脉)

SCC7-NLUC-puro成瘤影响因素与优化策略

影响因素	具体问题	优化策略	技术细节与验证方法
细胞标记稳定性	NLUC信号衰减或丢失	· 定期嘌呤霉素加压(1-2μg/mL,每3代) ·流式分选Luc+单克隆细胞	验证：流式荧光强度分析(>95%阳性率); Western Blot检测NLUC表达
底物使用(关键修正)	错误使用D-luciferin(传统Luc底物)	严格使用furimazine(NanoLuc®专用底物) ·剂量优化：66μg/kg(体内),3-5μM(体外 ) ·成像时机：腹腔注射后1-2 min成像	验证：体外发光检测(RLU值>107); 活体信号线性范围测试(10²-10⁹p/s)
细胞状态	传代致瘤性下降	·使用低代细胞(P5-P15) ·避免连续培养>20代	验证：细胞增殖曲线(倍增时间<24h); 克隆形成率(>50%)
接种操作	原位定位偏差	·立体定位仪引导(舌注射深度≤2 mm) ·术中即时BLI:注射后10min furimazine成像	验证：术后BLI信号聚集度>90%; 解剖定位确认
	细胞悬液活率低(<85%)	·胰酶消化≤3min ·重悬于30%基质胶(4℃操作)	验证：台盼蓝染色活率>90%; Annexin V凋亡检测(<5%)
模型建立	皮下成瘤延迟(>14天)	· 提高细胞量至5×10⁶(混合基质胶) ·预处理亚致死放疗(1Gy,促进血管生成)	验证：接种后7天BLI信号>5×10³p/s; CD31微血管密度(IHC>5%)
	原位转移率低(<30%)	·TGF-β抑制剂预处理(Galunisertib,1μM,24h) ·术后CXCR4拮抗剂(AMD3100,5mg/kg,每周2次 )	验证：第28天淋巴结离体BLI信号； H&E确认转移灶(>50%发生率)
微环境调控	免疫微环境失真	· 禁用抗生素(饮水/垫料) ·联合抗PD-1(10mg/kg,q3d)	验证：流式检测肿瘤浸润CD8+T细胞(>15%); 菌群测序(厚壁菌/拟杆菌比例)
检测灵敏度	微小转移灶漏检	· 离体器官BLI扫描(肺/肝/淋巴结) · 显微CT辅助定位(<0.1mm³病灶)	验证：组织学H&E金标准； NLUC检出限(10个细胞/病灶)