LA795-NLUC-puro小鼠肺腺癌细胞尾静脉成瘤验证

发布时间：2025-05-30 09:05:02 细胞资源库平台访问量：173

肺腺癌作为非小细胞肺癌(NSCLC)的主要亚型，占肺癌病例的40%以上，其高发病率、高死亡率及晚期患者治疗耐受性差的特点使其成为全球癌症相关死亡的首要诱因之一。由于肺腺癌具有高度异质性、复杂的肿瘤微环境(TME)及动态演变的分子特征(如EGFR、KRAS、ALK等驱动基因突变)，传统二维细胞系和基因工程小鼠模型难以全面模拟人类肿瘤的发生发展过程。构建精准的肺腺癌成瘤模型(如3D类器官培养、患者来源异种移植PDX模型或CRISPR-Cas9编辑的基因驱动模型)，对于解析肿瘤发生机制、筛选靶向药物、评估免疫治疗响应及探究耐药性演变至关重要。此类模型能够保留肿瘤细胞与基质细胞、免疫细胞的互作网络，为开发个体化治疗策略和实现临床转化提供不可替代的研究平台。

细胞简介

细胞名称：LA795-NLUC-puro小鼠肺腺癌细胞 (NLUC标记)

种属来源：小鼠组织来源：肺生长特性：贴壁生长

细胞形态：上皮细胞样

背景介绍：Luciferase LA795细胞稳定表达萤火虫荧光素酶。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照，也可用于活体动物成像实验。该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。其亲本株LA795细胞是一种常用于肺腺癌研究的小鼠源肿瘤细胞系，最初分离自T739近交系小鼠的自发性肺腺癌组织。该细胞系于20世纪80年代由中国医学科学院建立，具有高度的致瘤性和转移倾向，能够在同源小鼠体内稳定形成移植瘤，并模拟肺腺癌的侵袭和转移特性。LA795细胞保留了肺腺癌细胞典型的病理学特征，包括异常增殖能力、局部组织浸润及远处器官(如淋巴结、肝脏)转移潜能，因此被广泛应用于肺腺癌动物模型的构建，尤其是用于评估抗肿瘤药物疗效、探究肿瘤微环境互作机制以及研究转移相关分子通路。其同源移植模型(T739小鼠与LA795细胞同源)可避免异种移植的免疫排斥问题，为肺腺癌的体内研究提供了高重现性和稳定性的实验平台。

puro药筛浓度：LA795-NLUC-puro细胞puro药筛浓度为1.0ug/ml，培养过程中建议使用0.5ug/ml puro维持

培养须知：首次复苏或长期未用嘌呤霉素时，建议用含嘌呤霉素的培养基培养24-48小时以清除非抗性细胞。建议定期备份低代次细胞，并记录荧光素酶活性数据以确保实验一致性。如有特殊需求(如无血清培养)，需逐步驯化并验证基因稳定性。双标记(NLUC+Puro)确保长期基因稳定性，但需持续筛选压力。

LA795-NLUC-puro细胞系不同接种方式成瘤特性(仅供参考)

接种方式	宿主小鼠品系	接种细胞量	成瘤时间(天)	成瘤率	转移特性	检测方法	主要应用领域
尾静脉接种	BAIB-C小鼠	4×10⁶个/100μL	14-24	高	可形成转移灶(需活体成像监测)	活体荧光成像(Nano-Glo试剂 )	转移模型构建、药物疗效动态监测
皮下接种	T739小鼠	1×10⁶个/皮下	14-28	高	局部浸润生长，自发转移倾向(淋巴结、肝脏)	瘤体积测量、病理学分析	抗肿瘤药物筛选、肿瘤微环境研究
原位肺接种	T739小鼠	不明确	不明确	中高	高肺转移倾向	肺结节计数、组织病理学检测	转移机制研究、靶向治疗评价

肺腺癌细胞株成瘤特性差异对比(仅供参考)

细胞货号	细胞系	宿主小鼠品系	成瘤时间(天)	成瘤率	转移特性	主要应用领域
IM-M151	LA795	T739近交系小鼠	14-24(皮下接种后 )	高(稳定成瘤 )	高转移倾向(淋巴结、肝脏转移)	抗肿瘤药物筛选、转移机制研究、血管生成抑制剂评价
-	LA795亚系(LA1、LAD、LA5)	T739小鼠	不明确	高	转移能力差异显著(LA5>LAD>LA1)	转移潜能与侵袭性研究
IM-M060	LLC(Lewis Lung Carcinoma)	C57BL/6小鼠	7-10(皮下接种)	高	低转移(需尾静脉注射诱导肺转移)	化疗药物评价、免疫治疗研究
IM-H113	A549(人源肺腺癌)	免疫缺陷小鼠(如裸鼠)	14-21(皮下接种)	中高	低自发转移	靶向治疗、基因治疗研究

LA795-NLUC-puro成瘤关键影响因素及优化建议

影响因素类别	具体因素	潜在问题	优化策略
细胞处理	1.细胞活力与状态	活力低或传代次数过多导致成瘤能力下降	-控制胰酶消化时间(≤2分钟)
			-复苏后培养≥48小时再接种
			-使用低代次细胞(P3-P8代 )
	2.接种细胞量	细胞量不足(成瘤率低)或过量(坏死风险高)	-预实验梯度测试(建议1×10⁶~5×10⁶/只)
			-结合基质胶(Matrigel)提高局部细胞滞留
	3.细胞预处理	未去除死细胞或未同步化细胞周期	-接种前用PBS清洗细胞3次
			-血清饥饿法同步细胞(G0/G1期)
动物模型	1.免疫状态	免疫健全小鼠排斥人源/鼠源肿瘤细胞	-使用NOD/SCID或BALB/c nude小鼠(重度免疫缺陷)
			-接种后短期使用免疫抑制剂(如环孢素A)
	2.接种部位	皮下接种易脱落，原位成瘤技术难度高	-皮下接种选择血供丰富区域(如腋下/腹股沟)
			-原位接种使用影像引导(如超声定位)
	3.小鼠年龄与性别	老年鼠代谢慢，雌雄激素差异影响肿瘤生长	-选择6-8周龄小鼠(性别根据肿瘤类型选择，如乳腺癌用雌性)
实验操作	1.注射体积	体积过大导致细胞扩散或局部炎症	-控制注射体积(≤200μL/点)
			-缓慢推注(避免压力损伤
	2.麻醉与镇痛	麻醉过深或镇痛不足影响小鼠生理状态	-使用异氟烷吸入麻醉(精准控制剂量)
			-术后给予布洛芬缓解疼痛
	3.荷瘤时间	检测时间过早(信号弱)或过晚(坏死干扰)	-根据预实验确定最佳检测窗口(通常7-14天)
			-动态监测荧光信号(活体成像仪IVIS)
检测方法	1.荧光素底物使用	底物注射量不足或分布不均导致信号偏差	-腹腔注射底物
			-统一注射后成像时间(避免代谢差异)
	2.背景信号干扰	自发荧光或非特异性信号干扰定量	-设置空白对照组(未接种细胞小鼠)
			-成像前剃毛并清洁皮肤
	3.数据标准化	仅依赖荧光强度忽略肿瘤体积	-结合游标卡尺测量肿瘤体积(长径×短径²×0.5)
			-校正荧光强度与体积相关性
环境与维护	1.饲养条件	温度/湿度不稳定或营养不足影响小鼠健康	-SPF级环境维持(温度22-25℃,湿度40-60%)
			-提供高脂高蛋白饲料促进肿瘤生长
	2.微生物控制	隐性感染导致小鼠死亡或肿瘤异常	-定期检测小鼠病原体(如支原体、肝炎病毒)
			-饮用水添加抗生素(如恩诺沙星)