RENCA-NLuc-puro小鼠肾癌细胞成瘤验证

发布时间：2025-05-23 09:05:02 细胞资源库平台访问量：158

肾癌(Renal Cell Carcinoma, RCC)是泌尿系统常见的恶性肿瘤之一，占肾脏原发恶性肿瘤的90%以上，其发病率呈逐年上升趋势。由于早期症状隐匿且缺乏特异性，约30%的患者确诊时已发生转移，而晚期肾癌对传统放化疗不敏感，尽管靶向治疗和免疫治疗改善了患者生存率，但耐药性和个体异质性仍是临床难题。在此背景下，小鼠肾癌成瘤模型成为研究其发病机制、转移规律及治疗策略的重要工具。通过基因编辑技术(如条件性基因敲除或过表达)或移植人源肿瘤组织(PDX模型)，可模拟肾癌的病理特征和免疫微环境，为评估新型药物疗效、探索耐药机制及个性化治疗提供可控的实验平台。此外，小鼠模型还能克服临床样本获取的局限性，为揭示肾癌分子调控网络和潜在治疗靶点提供关键数据支撑。

细胞简介

细胞名称：RENCA-FLuc-puro小鼠肾癌细胞(NLuc标记)

种属来源：小鼠

组织来源：肾生长特性：贴壁生长

细胞形态：成纤维细胞样

背景介绍：Luciferase RENCA细胞稳定表达萤火虫荧光素酶。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照，也可用于活体动物成像实验。该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。其亲本株RENCA细胞源自BALB/c小鼠肾脏的肿瘤细胞系，广泛用于肾癌研究的实验模型。该细胞于1970年被分离并建立，经过支原体清除处理，现已成为模拟人类肾细胞癌(RCC)病理特征的重要工具。RENCA细胞的独特之处在于其生物学行为高度模拟人肾癌的进展特征，尤其是肿瘤的侵袭性和转移能力，例如可同时向肺、肝等器官转移，这一特性使其成为研究肾癌转移机制及治疗策略的理想模型。此外，该细胞不表达β-转化生长因子II受体(TGF-β RII)，这一特性与部分肾癌患者的分子特征相似，为研究肿瘤微环境及信号通路提供了特异性视角。

puro药筛浓度：RENCA-FLuc-puro细胞puro药筛浓度为1.0ug/ml，培养过程中建议使用0.5ug/ml puro维持

培养须知：首次复苏或长期未用嘌呤霉素时，建议用含嘌呤霉素的培养基培养24-48小时以清除非抗性细胞。建议定期备份低代次细胞，并记录荧光素酶活性数据以确保实验一致性。如有特殊需求(如无血清培养)，需逐步驯化并验证基因稳定性。双标记(NLuc+Puro)确保长期基因稳定性，但需持续筛选压力。

RENCA-FLuc-puro细胞系不同接种方式成瘤特性(仅供参考)

接种方式	细胞量	小鼠品系	成瘤时间	验证方法	注意事项
皮下接种	4.0×10⁶/小鼠	BAIB-C小鼠	7-10天可见肿块	活体成像(Nano-GloFluorofurimazine检测荧光强度，平均1.83×10⁷p/s/cm²/sr)	需确保细胞处于对数生长期，注射后缓慢退针避免漏液；建议单侧单点接种以避免相互影响
原位接种	5×10⁵~1×10⁶/小鼠	BALB/c小鼠	10-14天开始生长	HE染色病理检查、流式细胞术检测Treg变化	需明胶包被培养瓶，严格无菌操作；异位模型可模拟肿瘤微环境及免疫调控机制
大剂量单次接种	1×10⁷/小鼠	BALB/c或裸鼠	5-9天部分成瘤	触诊及组织病理分析	高剂量可能导致局部坏死或硬痂，需控制消化时间(1小时内完成操作)
联合Matrigel辅助	5×10⁶/小鼠(含30%Matrigel)	NOD-scid或NOG小鼠	缩短至5-7天	肿瘤体积测量及免疫组化	Matrigel可提高细胞存活率，适用于低成瘤性细胞系；需保持细胞低温状态直至注射
尾静脉注射(转移模型 )	1×10⁶/小鼠	BALB/c小鼠	14-21天肺/肝转移	活体成像及组织切片分析	需控制注射速度，避免细胞聚集；转移瘤TCA循环活跃，代谢特征与原发瘤不同

注意事项

小鼠品系：免疫缺陷小鼠(如BAIB-C、NOG)成瘤率更高，而BALB/c小鼠适合研究免疫微环境调控。

细胞状态与剂量：细胞需处于对数生长期(80-90%密度)，剂量过低(如<1×10⁶)易导致成瘤失败，过高可能引发炎症反应。

小鼠肾癌细胞株成瘤特性差异对比(仅供参考)

产品货号	细胞系	来源	动物模型	接种方式	细胞量	潜伏期(天)	成瘤率	转移倾向	应用方向
IM-M009	RENCA	小鼠(BALB/c)	BALB/c(免疫健全 )	皮下/肾包膜下/尾静脉	1×10⁶(皮下 )	7月21日	>95%	高(肺、肝转移，原位模型)	免疫治疗、转移机制研究
IM-H055	786-0	人(肾透明细胞癌)	Nude/NSG小鼠	皮下/肾原位	1×10⁶(皮下 )	21-35	60-80%	低(异种移植，局部生长 )	VHL基因相关靶向治疗研究
IM-H364	Caki-1	人(转移性肾癌)	Nude/NSG小鼠	皮下/尾静脉	5×10⁶(皮下 )	28-42	70-90%	高(肺、骨转移)	转移性肾癌药物筛选
IM-H058	ACHN	人(肾腺癌 )	Nude小鼠	皮下/肾包膜下	2×10⁶(皮下 )	21-28	80-90%	中等(局部侵袭)	化疗药物敏感性测试
IM-H061	OS-RC-2	人(肾细胞癌 )	NOD/SCID小鼠	皮下	1×10⁶	28-35	70-80%	低(缓慢生长 )	放疗抗性研究

RENCA-NLuc-puro成瘤关键影响因素及优化建议

影响因素类别	具体因素	对成瘤的影响	优化建议
细胞特性	细胞活力与状态	低活力细胞导致成瘤延迟或失败，荧光素酶(NLUC)表达下降	接种前检测细胞活力(>90%),使用低传代细胞(<15代)
	嘌呤霉素抗性筛选压力	长期无筛选压力可能导致NLUC基因丢失	体外培养时定期用嘌呤霉素(1-2μg/mL)维持筛选，体内接种前停用抗生素
	荧光素酶表达稳定性	荧光素酶表达随时间衰减，影响活体成像信号强度	选择慢病毒或CRISPR稳定整合的细胞株，避免长期传代
宿主因素	小鼠品系匹配性	RENCA为BALB/c来源，仅在同源品系(BALB/c)中成瘤率高	使用BALB/c小鼠(免疫健全)或BALB/c裸鼠(免疫缺陷，需验证 )
	宿主免疫状态	免疫健全小鼠可能清除肿瘤细胞，免疫缺陷鼠更易成瘤但缺乏免疫微环境研究价值	根据实验目的选择：免疫健全鼠(治疗研究)vs.免疫缺陷鼠(成瘤效率优先)
	宿主年龄与性别	年轻(6-8周)雌鼠成瘤更快，雄鼠因激素差异可能延缓肿瘤生长	统一使用同龄(6-8周)、同性别(推荐雌鼠)小鼠
实验操作参数	接种细胞量	细胞量过低(<5×105)成瘤率低，过高(>2×106)可能引发坏死或异常血管生成	皮下接种推荐1×10⁶细胞(BALB/c),原位(肾包膜)可降至5×10⁴
	接种部位与方式	皮下接种易操作但转移率低，原位(肾包膜)转移率高但手术难度大	根据研究目标选择：皮下(生长监测)vs.原位(转移模型)
	细胞悬液基质(如Matrigel)	添加Matrigel(10-30%)可提高成瘤率，促进血管生成	混合Matrigel(终浓度20%),保持低温防止凝固
检测与监测	活体成像时间窗	过早成像(<7天)信号弱，过晚(>28天)可能因肿瘤过大导致小鼠死亡	首次成像在接种后7-10天，每周1-2次，控制肿瘤体积≤1500mm³
	荧光素底物剂量	底物(Nano-Glo⑧)剂量不足导致信号低估，过量可能干扰小鼠代谢	按体重注射(100μL/10g),平衡信噪比与动物福利
	麻醉与成像条件一致性	麻醉深度不均影响荧光素分布，环境温度波动影响酶活性	统一使用异氟烷麻醉，成像前预热小鼠至37℃,控制成像室温