MKN45-FLuc人胃癌细胞成瘤细胞验证介绍

胃癌作为全球高发的恶性肿瘤之一，其复杂的发病机制和高度异质性为临床治疗带来巨大挑战。构建人胃癌细胞成瘤模型，是突破传统体外研究局限、模拟真实肿瘤微环境的关键技术手段。该模型不仅能精准再现胃癌细胞在体内的增殖、侵袭和转移特性，还可用于评估靶向药物疗效、解析耐药机制及探索免疫治疗新策略，为转化医学研究提供"活体实验室"。通过这一模型，我们得以在分子、细胞和整体水平上系统解析胃癌进展规律，加速从基础研究到临床应用的转化步伐，为个体化精准治疗方案的制定奠定科学基石。

细胞简介

细胞名称：MKN45-FLuc-puro(人胃癌细胞-荧光素酶标记)

种属来源：人

组织来源：胃

生长特性：贴壁生长

细胞形态：上皮细胞样

背景介绍：Luciferase MKN45细胞稳定表达萤火虫荧光素酶。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照，也可用于活体动物成像实验。该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。其亲本株是由S·Akiyama建立，源于一位35岁患有印戒细胞癌的女性的胃淋巴结。

puro药筛浓度：MKN45-Luc细胞puro药筛浓度为1. 0ug/ml，培养过程中建议使用0.5ug/ml浓度puro维持

培养须知：MKN45-Luc细胞生长过程中容易成团，消化时间需要控制好，不能吹打过猛，吹打过猛容易产生细胞碎片，导致皿底变脏。消化用的胰酶放到常温再加，要浸没过细胞，加完放培养箱至少五分钟，到用胰酶能轻松吹下来。要细胞吹下来再终止消化。培养基要保持充足。

MKN45亲本株及衍生细胞系在小鼠体内成瘤案例(仅供参考)

MKN45亲本株及衍生细胞系成瘤模型特点总结

1.成瘤时间：通常接种后 2-4 周 即可形成可见肿瘤，具体时间与接种部位(皮下或原位)及细胞数量相关。

下列实验数据仅供参考：

皮下成瘤：

肿瘤体积：接种后14天达200-300 mm³，21天达800-1000 mm³。

基质胶优化：添加50%基质胶(Corning #356237)可提高成瘤率至100%。

原位移植：

荧光标记(MKN45-Luc)：活体成像(IVIS)显示肝转移信号强度在28天达1×108 p/s/cm²/sr。

病理验证：HE染色确认肝组织中转移灶，免疫组化显示VEGF、MMP9高表达。

高转移亚系(MKN45sci)：

筛选方法：通过反复体内传代筛选出高侵袭亚系，肺转移能力提升至60%。

2.肿瘤生长特性：

快速增殖：皮下接种后肿瘤体积可在 4 周内达到 500-1000 mm³。

侵袭性及转移性：原位接种模型显示MKN45 肿瘤可向肝、肺等器官转移，模拟胃癌临床进展。

3.应用领域：

药物疗效评估：常用于化疗药物(如紫杉醇、氟尿嘧啶)及靶向治疗(如 HER2 抑制剂)的体内验证。

不同胃癌细胞株成瘤能力对比(仅供参考)

MKN45-Fluc-puro细胞成瘤影响因素及优化策略

小鼠品系：

BALB/c-nu(T细胞缺陷)成瘤率高于NOD/SCID(B/T/NK细胞联合缺陷)，但后者更适合免疫治疗研究。

细胞活力：

细胞活力需>95%(台盼蓝染色验证)，活力低于80%时成瘤率降至60%以下。

基质胶使用：

浓度：推荐8-10 mg/ml，低于6 mg/ml时成瘤率下降20%。

混合比例：细胞悬液与基质胶1:1混合，冰上操作防止凝固。

常见问题与解决方案

基于MKN45-FLuc-puro细胞成瘤模型的代表性药物研究(仅供参考)

MKN45-Fluc-puro细胞成瘤实验设计建议

模型选择：

肝转移研究：优先使用原位移植模型(高肝转移率)。

肺转移快速筛选：选择尾静脉注射模型(周期短)。

药物评价指标：定量标准：转移灶数量、IVIS信号强度、生存期延长率。

分子机制：通过Western blot检测EMT标志物(E-cadherin↓, Vimentin↑)。