肺腺癌吉非替尼耐药新机制！TFAP2C 激活 PTGES，NOTCH3 通路成关键

肺腺癌(LUAD)是癌症相关死亡的主要原因之一，吉非替尼作为表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂在治疗中广泛应用，但耐药性限制了其疗效。

来自安阳市肿瘤医院的团队在《Journal of Clinical Biochemistry and Nutrition》(2025, 77:1–9)发表研究，首次证实转录因子 TFAP2C 通过靶向激活 PTGES(前列腺素 E 合成酶)，并通过 NOTCH3 信号通路增强 LUAD 细胞对吉非替尼的耐药性。该研究揭示了 TFAP2C/PTGES/NOTCH3 轴在耐药中的关键作用，为逆转 LUAD 吉非替尼耐药提供了新靶点。

本研究旨在探究 TFAP2C 和 PTGES 在 LUAD 吉非替尼耐药中的作用及机制。方法包括：通过 TCGA 数据库筛选差异基因，确定 PTGES 为研究对象;利用 qPCR 和 Western blot 检测 PTGES 和 TFAP2C 在 LUAD 组织及细胞中的表达;通过 CCK-8、集落形成实验评估细胞活力和耐药性;借助染色质免疫沉淀(CHIP)和双荧光素酶报告实验验证 TFAP2C 与 PTGES 的靶向关系;利用基因集富集分析(GSEA)和通路抑制剂实验确认 NOTCH3 通路的作用。结果显示，TFAP2C 转录激活 PTGES，通过 NOTCH3 通路促进耐药，为临床干预提供实验依据。

研究背景

吉非替尼通过抑制 EGFR 信号治疗 LUAD，但耐药性是临床难题。PTGES 作为前列腺素 E2(PGE2)合成的关键酶，在多种癌症中高表达并促进进展，但其在 LUAD 耐药中的作用未知。TFAP2C 作为 AP2 家族转录因子，参与肿瘤增殖和耐药调控，但其与 PTGES 的关联及对吉非替尼耐药的影响尚未明确。

现有研究表明，NOTCH3 信号通路在肿瘤耐药中起重要作用，而 PTGES 可能通过该通路调控细胞功能。本研究通过体内外实验结合生物信息学分析，揭示 TFAP2C-PTGES-NOTCH3 轴在 LUAD 吉非替尼耐药中的机制，填补了相关领域空白。

实验结果

图 1：PTGES 在 LUAD 中高表达

该图通过 TCGA 数据库和细胞实验显示：(A)LUAD 肿瘤组织中 PTGES mRNA 表达显著高于癌旁正常组织(P<2.2e-16);(B)qPCR 证实 LUAD 细胞系(A549、NCI-H1975、PC-9)中 PTGES mRNA 水平显著高于人支气管上皮细胞 BEAS-2B，提示 PTGES 可能参与 LUAD 发生发展。

图 2：PTGES 增强 LUAD 细胞对吉非替尼的耐药性

该图通过吉非替尼耐药细胞系 PC-9/GR 实验显示：(A)siRNA 沉默 PTGES 后其 mRNA 表达降低，过表达后升高，证实转染有效;(B、C)CCK-8 和集落形成实验表明，沉默 PTGES 显著降低细胞活力和集落数，过表达则相反;(D)不同浓度吉非替尼处理后，沉默 PTGES 使 PC-9/GR 细胞的 IC50 从 11.15μM 降至 5.579μM，过表达则使 IC50 从 10.71μM 升至 15.35μM，证实 PTGES 直接增强耐药性。

图 3：PTGES 通过 NOTCH3 通路调控耐药

该图揭示 PTGES 与 NOTCH3 的关联：(A)GSEA 分析显示 PTGES 显著富集于 NOTCH3 激活通路;(B)Western blot 表明，沉默 PTGES 降低 NOTCH3 蛋白表达，过表达则升高;(C-E)加入 NOTCH3 抑制剂 BMS-986115 后，PTGES 过表达诱导的细胞活力增强、集落增多及 IC50 升高(从 11.22μM 升至 15.12μM)均被逆转，证实 PTGES 通过 NOTCH3 通路促进耐药。

图 4：TFAP2C 是 PTGES 的上游转录调控因子

该图验证 TFAP2C 与 PTGES 的靶向关系：(A)hTFtarget 预测并结合差异基因分析，确定 TFAP2C 为 PTGES 的潜在上游转录因子;(B)Pearson 分析显示两者表达呈强正相关(R=0.367，P=2.2e-16);(C、D)TCGA 数据和 qPCR 证实 TFAP2C 在 LUAD 组织和细胞中高表达;(E)CHIP 实验显示 TFAP2C 可结合 PTGES 启动子区域(Anti-TFAP2C 组 DNA 富集显著高于 IgG 组);(F)双荧光素酶实验表明，沉默 TFAP2C 显著降低 PTGES 启动子驱动的荧光素酶活性，证实 TFAP2C 直接靶向激活 PTGES。

图 5：TFAP2C 通过 PTGES/NOTCH3 通路促进耐药

该图确认通路完整性：(A)qPCR 显示，沉默 TFAP2C 后 PTGES mRNA 降低，过表达 PTGES 可逆转;(B、C)沉默 TFAP2C 显著降低细胞活力和集落数，过表达 PTGES 可恢复;(D)吉非替尼处理后，沉默 TFAP2C 使 IC50 从 10.59μM 降至 5.702μM，过表达 PTGES 可恢复至 11.43μM，证实 TFAP2C 通过 PTGES 调控耐药。

研究结论

TFAP2C 在 LUAD 中高表达，通过直接结合 PTGES 启动子使其转录激活，进而通过 NOTCH3 信号通路增强细胞活力和对吉非替尼的耐药性。该研究揭示了 TFAP2C/PTGES/NOTCH3 轴在耐药中的核心作用，为开发靶向药物逆转 LUAD 吉非替尼耐药提供了新策略。