科研揭秘绿茶中EGCG的肠道屏障保护作用

绿茶因其丰富的儿茶素而受到关注，其中(−)表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin-3-gallate，EGCG)是含量最丰富的儿茶素。由于其具有抗氧化、抗炎等多种生物学功能，被认为对治疗多种疾病具有潜力，包括炎症性肠病(Inflammatory Bowel Disease，IBD)。IBD的特征是肠道屏障功能受损，促炎细胞因子如肿瘤坏死因子α(TNFα)和干扰素γ(IFNγ)在其中发挥关键作用。然而，EGCG对肠道屏障功能的具体影响及其潜在机制尚不清楚。

2025年5月14日发表在Frontiers in Pharmacology上题为The green tea component (-)-epigallocatechin-3-gallate protects against cytokine-induced epithelial barrier damage in intestinal epithelial cells的研究通过建立三种不同的肠道细胞模型，包括结肠模型T84细胞、小肠模型Caco-2细胞及来源于人十二指肠活检的2D类器官，探讨EGCG对肠道屏障功能的影响及其保护机制。

实验中，通过测量跨上皮电阻(TER)、大分子通透性、凋亡以及紧密连接蛋白的表达和定位等指标，评估了EGCG对TNFα和IFNγ诱导的肠道上皮屏障损伤的保护作用。研究发现EGCG能够有效防止细胞因子引起的TER下降和大分子通透性增加，减少细胞凋亡，并调节紧密连接蛋白的表达和定位，从而保护肠道屏障功能。这一发现为EGCG作为IBD辅助治疗策略提供了新的科学依据。

图示描述

1) EGCG对TNFα和IFNγ诱导的T84单层上皮屏障功能障碍的影响。图1A显示，200 µM EGCG预处理2小时后，TNFα和IFNγ处理使TER降至11% ± 1%，而EGCG预处理组的TER恢复至89% ± 5%(p < 0.001)，表明EGCG能显著抑制细胞因子引起的TER下降。图1B表明，EGCG预处理显著抑制了TNFα和IFNγ诱导的FD4通透性增加(p < 0.001)，进一步证实了其对肠道屏障功能的保护作用。图1C和D的Western blot分析显示，EGCG预处理显著抑制了TNFα和IFNγ诱导的caspase-3裂解(p < 0.001)，与凋亡抑制剂Q-VD-Oph效果相当，表明EGCG的保护作用可能与其抑制细胞凋亡的能力有关。总体而言，图1的结果表明，EGCG能够通过抑制细胞凋亡和维持紧密连接的完整性，保护T84单层细胞免受TNFα和IFNγ诱导的屏障功能障碍。

图1展示了EGCG在T84单层细胞中对由TNFα和IFNγ诱导的上皮屏障功能障碍的保护作用。

2) EGCG对T84单层中紧密连接蛋白表达和定位的保护作用。图2A的Western blot分析显示，EGCG显著抑制了TNFα和IFNγ诱导的claudin-2和claudin-8的下调，以及claudin-4和claudin-5的上调(p < 0.05和p < 0.01)。图2B通过免疫荧光染色和共聚焦激光扫描显微镜观察了claudin-1和claudin-5的亚细胞定位，发现EGCG预处理抑制了TNFα和IFNγ引起的claudin-1重新分布和claudin-5内化。这些结果表明，EGCG不仅能够调节紧密连接蛋白的表达，还能维持其正确的亚细胞定位，这对于维持肠道屏障功能至关重要。总体而言，图2的结果表明，EGCG通过调节紧密连接蛋白的表达和定位，保护T84单层细胞免受TNFα和IFNγ诱导的屏障功能障碍。

图2探讨了EGCG对T84单层细胞中紧密连接蛋白表达和定位的影响。

3) EGCG对Caco-2单层屏障功能及细胞因子诱导的干扰的影响。图3展示了EGCG在Caco-2单层细胞中对屏障功能及TNFα和IFNγ诱导的干扰的影响。图3A显示，200 µM EGCG预处理2小时后，TNFα和IFNγ处理使TER降至68%，而EGCG预处理组的TER恢复至89% ± 3%(p < 0.001)，表明EGCG对Caco-2单层细胞的屏障功能具有保护作用。图3B表明，EGCG预处理显著抑制了TNFα和IFNγ诱导的FD4通透性增加(p < 0.001)。图3C和D的Western blot分析显示，EGCG预处理显著抑制了TNFα和IFNγ诱导的caspase-3裂解(p < 0.001)。总体而言，图3的结果表明，EGCG能够通过抑制细胞凋亡和维持紧密连接的完整性，保护Caco-2单层细胞免受TNFα和IFNγ诱导的屏障功能障碍。

图3展示了EGCG在Caco-2单层细胞中对屏障功能及TNFα和IFNγ诱导的干扰的影响

4) EGCG对Caco-2单层中紧密连接蛋白表达的影响。图4A的Western blot分析显示，EGCG显著上调claudin-4的表达(p < 0.001)，并显著下调claudin-2和claudin-7的表达(p < 0.05和p < 0.001)。图4B通过免疫荧光染色和共聚焦激光扫描显微镜观察了claudin-2和claudin-4的亚细胞定位，发现EGCG处理后，claudin-2的表达减少，而claudin-4的表达增加。TNFα和IFNγ处理则导致claudin-2表达增加，而claudin-4表达减少，EGCG预处理则抑制了这种变化。这些结果表明，EGCG不仅能够调节紧密连接蛋白的表达，还能维持其正确的亚细胞定位，这对于维持肠道屏障功能至关重要。总体而言，图4的结果表明，EGCG通过调节紧密连接蛋白的表达和定位，保护Caco-2单层细胞免受TNFα和IFNγ诱导的屏障功能障碍。

图4探讨了EGCG在Caco-2单层细胞中对紧密连接蛋白表达的影响。

5) EGCG对2D-类器官屏障功能及细胞因子诱导的干扰的影响。图5A显示，200 µM EGCG预处理过夜后，TNFα和IFNγ处理使TER降至57 ± 8 Ω*cm²，而EGCG预处理组的TER恢复至343 ± 24 Ω*cm2(p < 0.001)。图5B表明，EGCG预处理显著抑制了TNFα和IFNγ诱导的FD4通透性增加(p < 0.001)。图5C和D的Western blot分析显示，EGCG预处理显著抑制了TNFα和IFNγ诱导的caspase-3裂解(p < 0.001)。总体而言，图5的结果表明，EGCG能够通过抑制细胞凋亡和维持紧密连接的完整性，保护2D-类器官免受TNFα和IFNγ诱导的屏障功能障碍。

图5展示了EGCG在2D-类器官中对屏障功能及TNFα和IFNγ诱导的干扰的影响。

全文总结

本研究通过T84细胞、Caco-2细胞及2D-类器官三种模型，探讨了绿茶成分EGCG对肠道屏障功能的保护作用。结果显示，EGCG能显著抑制TNFα和IFNγ诱导的跨上皮电阻(TER)下降与大分子通透性增加，减少细胞凋亡，表现为降低caspase-3裂解。此外，EGCG可调节紧密连接蛋白的表达和定位，如在T84细胞中防止claudin-1和claudin-5的错位，在Caco-2细胞及2D-类器官中上调claudin-4，下调claudin-2和claudin-7。这些发现表明EGCG可有效保护肠道屏障免受炎症细胞因子的损伤，为开发新型IBD治疗策略提供了科学依据。