癌症疫苗 VSV-GP 如何激发抗瘤 T 细胞？剂量、接种方式等关键因素揭秘

同源异体小鼠肿瘤模型是免疫肿瘤学(I/O)研究中不可或缺的临床前模型，但它们对免疫检查点抑制剂(ICIs)的反应有限，这可能是由于它们的固有低免疫原性。为了解决这一问题，研究人员通过将鸡卵清蛋白(OVA)这一高度免疫原性的蛋白质表达到同源异体肿瘤细胞中，开发了新的免疫原性同源异体模型。这些模型，如DC2.4-OVA和B16-OVA，显示出比它们的亲本细胞系更慢的肿瘤生长速度，这可能是由于免疫介导的排斥反应。更重要的是，这些OVA表达的模型对ICIs，特别是抗PD-1治疗，表现出更高的敏感性，这表明它们在增强T细胞介导的免疫反应方面具有潜力。此外，通过过继T细胞转移实验，研究人员验证了这些模型中存在肿瘤特异性记忆T细胞。这些结果表明，OVA工具细胞不仅增强了对ICIs的反应，而且为临床前免疫治疗评估提供了新的、具有更高免疫原性的同源异体模型，这对于I/O研究具有重要的意义。

基本信息

英文标题：Characterization of the Anti-Viral and Vaccine-Specific CD8⁺ T Cell Composition upon Treatment with the Cancer Vaccine VSV-GP

中文标题：癌症疫苗 VSV-GP 治疗后抗病毒及疫苗特异性 CD8⁺ T 细胞组成的特征分析

发表期刊：《Vaccines》

影响因子：3.4

作者单位：

1. Institute of Virology, Medical University of Innsbruck, Innsbruck, Austria

2. Christian Doppler Laboratory for Viral Immunotherapy of Cancer, Innsbruck, Austria

3. Department of Internal Medicine V, Haematology & Oncology, Medical University Innsbruck, Innsbruck, Austria

作者信息：

Tamara Hofer, Lisa Pipperger, Sarah Danklmaier

研究背景

细胞毒性 CD8⁺ T 细胞是抗肿瘤和抗病毒免疫的核心执行者，其数量和效应表型(如短寿命效应细胞 SLECs、记忆前体效应细胞 MPECs)直接影响疫苗疗效。VSV-GP 是一种基因工程溶瘤病毒疫苗载体，通过替换糖蛋白降低神经毒性，已进入临床研究。本研究探讨疫苗剂量、接种途径、靶抗原阳性肿瘤存在及异源 prime-boost(肽疫苗联合病毒载体)对 VSV-GP 诱导的抗病毒及疫苗特异性 CD8⁺ T 细胞数量和表型的影响，为优化癌症疫苗方案提供依据。

研究方法

构建表达卵清蛋白(OVA)的重组病毒疫苗 VSV-GP-OVA 及肽疫苗 KISIMA-OVA;使用 C57BL/6JRj 小鼠，建立 B16-OVA 黑色素瘤模型(皮下接种 5×10⁵细胞);设置不同剂量(10⁷ vs 10⁸ TCID₅₀)、接种途径(静脉 i.v.、腹腔 i.p.、肌内 i.m.、皮下 s.c.)、prime-boost 间隔 10 天，异源组合组采用 KISIMA-OVA(prime)+VSV-GP-OVA(boost)，同源组为 VSV-GP-OVA(prime+boost);通过流式细胞术(tetramer 染色检测 OVA 和 VSV-N 特异性 CD8⁺ T 细胞，表面标志物 KLRG1/CD127 区分 SLECs/MPECs)分析外周血、肿瘤及肿瘤引流淋巴结(tdLN)中的细胞比例，评估肿瘤生长及免疫细胞浸润。

实验结果

图1：展示不同剂量 VSV-GP-OVA 对 CD8⁺ T 细胞反应的影响，高剂量(10⁸ TCID₅₀)在 boost 后诱导更高比例和数量的 OVA 特异性 CD8⁺ T 细胞，而 VSV-N 特异性 CD8⁺ T 细胞在 boost 后减少，表明高剂量增强靶抗原特异性反应且减弱对病毒载体的免疫反应。

图2：分析 prime-boost 及剂量对 CD8⁺ T 细胞效应亚型的影响，高剂量组 OVA 特异性 CD8⁺ T 细胞中 SLECs 比例更高、MPECs 比例更低，而 VSV-N 特异性亚型不受剂量影响，提示剂量主要影响靶抗原特异性细胞的分化方向。

图3：探究接种途径的影响，i.v. 和 i.p. 诱导的 OVA 特异性 CD8⁺ T 细胞比例最高且抗病毒反应最低，i.v. 在 boost 后 OVA 特异性 SLECs 比例最高，表明静脉接种是较优途径。

图4：研究靶抗原阳性肿瘤的作用，肿瘤存在显著提高 prime 后 OVA 特异性 CD8⁺ T 细胞比例及 SLECs 比例，肿瘤浸润 OVA 特异性 CD8⁺ T 细胞中 SLECs 比例高于抗病毒 T 细胞，说明肿瘤可预激活靶抗原特异性细胞且肿瘤内以短期效应表型为主。

图5：分析异源疫苗组合的效果，异源组在肿瘤和 tdLN 中 OVA 特异性 CD8⁺ T 细胞比例显著高于同源组，且 VSV-N 特异性 T 细胞更少，表明异源组合更利于靶抗原特异性细胞向肿瘤富集。

研究结论

高剂量 VSV-GP-OVA 增强靶抗原特异性 CD8⁺ T 细胞及 SLECs 比例，静脉接种诱导最高靶抗原反应和最低抗病毒反应;靶抗原阳性肿瘤预激活特异性 CD8⁺ T 细胞，提高其比例及 SLECs 表型，肿瘤内靶抗原特异性 T 细胞以 SLECs 为主、抗病毒 T 细胞以 MPECs 为主;肽疫苗与 VSV-GP 的异源组合在肿瘤和引流淋巴结中诱导更高比例靶抗原特异性 CD8⁺ T 细胞，减少载体相关抗病毒反应，优于同源接种，为优化 VSV-GP 疫苗方案提供依据。