TF-1人红系白血病细胞（STR鉴定报告）

货号：IM-H179 来源：ATCC

规格：1x10⁶cells/T25或1mL冻存管

形态：淋巴母细胞样，半贴半悬

培养基：RPMI-1640+10%FBS+2ng/ml rhGM-CSF+1%PS

传代方法：1:2至1:3，每周 3次

TF-1细胞呈圆形或贴壁铺开，细胞脱落大量的细胞质颗粒

TF-1 人红白血病细胞说明书

价格：¥2500

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背景介绍培养操作冻存步骤售后服务

背景简介

TF-1细胞系1987年由Kitamura T等建立，源于一名35岁日本男性的肝素化骨髓抽取样本，该患者具有严重的全血细胞减少症。细胞生长完全依赖于IL-3或GM-CSF，对IL-5无反应。多种淋巴因子和细胞因子对该细胞都有作用，如：IL-1、IL-4、IL-6、IL-9、IL-11、IL-13、CSF、LIF、NGF。该细胞不表达血型糖蛋白A和碳酸酐酶I。由该细胞的形态和细胞化学特征及珠蛋白基因的组成性表达，显示该细胞属于红系。氯高铁血红素和δ氨基乙酰丙酸诱导细胞合成血红蛋白，TPA刺激细胞向巨噬细胞样细胞分化。

一、细胞基本属性
细胞名称	TF-1人红系白血病细胞（STR鉴定报告）
细胞别称	TF1; MFD-1；TF-1；人红白血病细胞
种属来源	人
年龄性别	男；35岁
组织来源	骨髓
生长特性	半贴半悬
细胞形态	淋巴母细胞样
细胞代数	10代以内
STR位点	Amelogenin：X，Y；CSF1PO：12，13；D13S317：8，9；D16S539：9，12；D18S51：13；D19S433：14，16；D21S11：30；D2S1338：19；D3S1358：15；D5S818：13；D7S820：12；D8S1179：11，15；FGA：18，19；TH01：7，9；TPOX：8；vWA：15，17；
STR鉴定位点图
生物安全等级	1
使用权限	A类
细胞规格	1x10⁶cells/T25或1mL冻存管
支原体检测	无
保藏机构	ATCC; CRL-2003 DSMZ; ACC-334 ECACC; 93022307
培养基	RPMI-1640+10%FBS+2ng/ml rhGM-CSF+1%PS
培养条件	气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件	无血清冻存液，液氮储存
倍增时间	~36-72 hours
染色体	78~104
细胞货期	现货，1周左右
运输方式	复苏发货（T25瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用）顺丰快递
供应限制	仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明	以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主
TF-1人红系白血病细胞培养常见问题
1.TF-1人红系白血病细胞形态特性 TF-1人红系白血病细胞形态是半贴壁半悬浮。正常生长的TF-1细胞呈圆形或贴壁铺开，细胞脱落大量的细胞质颗粒，在培养物中积累，注意不要与细菌混淆。 TF-1细胞直径15 ~ 20 μm，核大而粗，经Wright-Giemsa染色后可以看到，多数细胞核仁颜色深，胞浆嗜碱性，胞浆泡多发，偶见多核细胞，虽然大多数细胞单一，但也有非常大的多核细胞。在透射电子显微镜下，细胞核呈锯齿状(如图3), 扫描电子显微镜下，细胞呈绒毛状表面，有少量泡。 2.TF-1人红系白血病细胞注意事项 TF-1细胞不太好养，如果细胞状态不是很好，可以补加一点血清；因子对细胞作用很大，且细胞对因子依赖性强；尽量少离心，可以直接补液。
二、细胞培养操作
到货方式	复苏细胞/T25瓶运输
收货处理	1.收到细胞后，请检查发货培养瓶的状况，是否有破损、漏液、浑浊等现象。如果有，请立即和我们联系；如果没有，请您用75%酒精消毒细胞瓶外壁，再将其置于37度培养箱静置6h。 2.静置后观察细胞状态，在显微镜下确认细胞生长状态时，最好在低倍镜（4或5X物镜）下进行，能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20X物镜下，同时给刚收到的细胞拍照，（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。拍照反馈给我们。 3.静置后需镜下拍照（看整体密度） a.如密度50%以下，建议换液并竖瓶培养 b.如密度50%-80%，建议换液培养，隔天观察密度 c.如密度90%，建议传代 4.换液及传代处理前，培养瓶竖着放置至少半小时（使细胞沉到瓶底）；收集上清，必须将瓶内所有培养基（70ml）全部收集！并用PBS（10ml）润洗瓶底并收集！离心转速为1000rpm，5min。
传代密度	细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养
传代方法	方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心3-5min分钟，弃去上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:4的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
到货方式	冻存细胞/1ml冻存管运输
收货处理	1.干冰运输的细胞到货，请检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系。 2.为保证细胞的高存活率，收到产品后，请立即解冻复苏细胞，如若不能复苏请立即转入液氮冻存。
培养皿/瓶	一管细胞建议接种到6cm培养皿或者T25瓶
复苏操作	1.将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。 2.在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。 3.然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜）。 4.第二天换液并检查细胞密度。
注意事项	1.运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 2.因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 3. 冻存细胞发货2管，客户先复苏一支，若复苏失败及时联系我方并在我方指导下复苏第二支。 4. 申请售后时请提供细胞收货时及反馈售后当天细胞清晰照片及培养信息，建议客户在细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。 5.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。 6. 细胞在不同实验室培养由于所使用培养基及血清品牌、个人操作习惯、培养瓶品牌等诸多培养条件不尽相同，导致细胞培养形态、生长速度、贴壁情况均可能有所差异，对于此类细胞适应环境生长的行为，不予过度解释或免费售后。
三、细胞冻存操作
冻存液配方	无血清冻存液，液氮储存
冻存密度	如果是有要求每管要冻多少细胞，那就用1ml完培重悬后，取部分按平时方法计数，剩下的细胞按计数需要的细胞量冻存即可。如果没要求，那就按平时，一个皿冻一管。
冻存方法	待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例 1.收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，加1 mL血清重悬细胞，进行细胞计数。 2.根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x10⁶~1x10⁷/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。 3.将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项	冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案

科研细胞购买常见问题

问：为什么官网的培养条件和我看的文献里细胞培养条件不一样呢？

答：部分细胞是会出现多种培养条件，我们公司优先选择引种来源的培养条件以及建系者所用培养条件，出现差异的原因是不同实验室在保藏过程中更改了细胞的培养条件，为了避免细胞突然更换培养条件后不适应，建议老师使用厂家推荐的培养条件培养。

问：冻存细胞运输与常温细胞运输相比有什么区别？

答：细胞株发货有常温或者冻存两种形式，常温细胞货期一般一周左右，复苏活细胞一个T25瓶发货；冻存细胞有库存的话，一般当天或者隔天可以发货，细胞系冻存细胞担心客户复苏不成功所以赠送了一管，实际发货2管；原代冻存细胞发货1管，冻存细胞发货是10公斤干冰及顺丰运输，所以冻存细胞需额外支付干冰及运输费200元。

问：培养细胞的培养瓶可以重复利用吗？

答：一般不建议重复利用，特别是贴壁不牢固细胞，重复利用会导致吸附性变差，漂浮增多;一个T25瓶建议使用最多不超过3次，其次需要注意无菌操作，避免污染。

问：运输细胞用的培养基可以回收使用吗?

答：不能回收使用的，运输用的培养基(灌液培养基)营养在路上已经消耗得差不多，所以收到细胞之后，培养箱静置4-6h之后，请及时按照说明书细胞培养条件更换新鲜培养液培养。

问：冻存的细胞出现颜色不一致，有的红有的粉，对复苏会有影响吗？

答：这种情况容易在不同冻存批次间出现，与冻存细胞的密度、冻存液配方、温度导致pH变化等有关，偶尔有遇到这种情况，不是绝对性对细胞状态有影响，可以复苏看下。

问：不同引种单位的同一株细胞，RRID都是一样的吗？

答：是的，同一个细胞系只有一个RRID。

科研细胞售后服务

细胞重发标准

1.细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发；

2.收到细胞未开封，如出现污染状况，重发；

3.收到细胞3天内，发现污染问题，经核实后，重发；

4.常温发货的细胞静置4小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后，出现污染，经核实后，重发；

5.细胞活性问题，请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，经核实后，重发；

6.视具体情况而定。

细胞不予重发标准

1.客户操作造成细胞污染，不重发；

2.客户严重操作失误致细胞状态不好，不重发；

3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；

4.细胞状态不好，未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片，不重发；

5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的，不重发；

6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的，不重发；

7.视具体情况而定。