EEC人子宫内膜上皮细胞永生化（STR鉴定报告）

背景简介

‌EEC细胞‌，全称为人子宫内膜上皮细胞，是一种特殊的上皮细胞，属于单层柱状上皮，包含分泌细胞和纤毛细胞两种。这些细胞分离自子宫组织，是子宫内膜(子宫黏膜)的组成部分，位于子宫腔面，与生殖生理活动密切相关。子宫内膜可以分为浅表的功能膜和深部的基底层，其中功能层较厚，约占内膜厚度的4/5，而基底层较薄较致密，约占1/5。功能层可剥脱，而基底层不可剥脱。子宫内膜上皮细胞的主要功能包括对动情素和孕激素的反应，随着性周期(发情周期、月经周期)发生显著的变化，并与胚胎附植密切相关，在生殖生理的研究中占重要地位。体外培养的子宫内膜上皮细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具有重要意义‌。

此外，EEC细胞的研究还涉及到肠内分泌细胞的分化过程，这些细胞是存在于胃、小肠和结肠上皮中的激素分泌细胞。肠内分泌细胞的分化过程是一个被高度调控的过程，涉及许多特异性的转录因子形成调控网络对下游基因表达进行调节。研究还发现了一个关键因子ZNF800，它作为肠内分泌细胞分化的主要抑制因子，进一步加深了我们对EEC细胞分化机制的理解‌。

细胞产品信息

人子宫内膜上皮细胞文献溯源

1948年始，迄今为止，关于Human endometrial epithelial cells人子宫内膜上皮细胞的文献有4892篇。

在pubmed数据库中用“Human endometrial epithelial cells”搜索该关键词，第一篇为1963年M J CLYMAN在“Am J Obstet Gynecol ”上发表的“A new structure observed in the nucleolus of the human endometrial epithelial cell”。

人子宫内膜上皮细胞应用领域

 研究发现，子宫内膜上皮细胞能够表达多种免疫调节分子，如Toll样受体，这些分子在调节子宫内膜免疫反应中起着重要作用。例如，研究人员发现子宫内膜上皮细胞能够通过Toll样受体3(TLR3)对双链RNA(dsRNA)作出反应，从而在抗病毒免疫中发挥作用。此外，研究人员还研究了子宫内膜上皮细胞如何通过分泌细胞因子(如IL-6、IL-8)来调节免疫细胞的活化和增殖。

 研究人员研究了子宫内膜上皮细胞在不同生理周期阶段的分化和增殖情况，以及它们对激素(如雌激素和孕激素)的反应。例如，研究发现雌激素能够促进子宫内膜上皮细胞的增殖，而孕激素则能够抑制这种增殖。这些研究有助于理解子宫内膜在月经周期中的变化，以及激素如何影响子宫内膜上皮细胞的功能。

 子宫内膜上皮细胞对于胚胎的植入过程至关重要。研究人员研究了它们如何与胚胎相互作用，以及它们在胚胎植入过程中的变化。例如，研究发现子宫内膜上皮细胞能够通过分泌细胞因子(如白血病抑制因子LIF)来促进胚胎植入。这些研究有助于理解胚胎植入的机制，以及如何改善不孕症患者的胚胎植入率。

 子宫内膜异位症是一种常见的妇科疾病，研究人员研究了子宫内膜上皮细胞在疾病发生发展中的作用。例如，研究发现子宫内膜上皮细胞能够通过分泌细胞因子(如转化生长因子TGF-β)来促进异位子宫内膜的生长和侵袭。这些研究有助于理解子宫内膜异位症的发病机制，为开发新的治疗方法提供理论基础。

 研究人员探索了利用子宫内膜上皮细胞进行组织工程的可能性，以修复或重建受损的子宫内膜。例如，研究人员利用子宫内膜上皮细胞构建了人工子宫内膜，用于研究子宫内膜的生理功能和疾病机制。这些研究有助于开发新的治疗方法，用于治疗子宫内膜损伤或子宫内膜异位症。

 研究人员研究了子宫内膜上皮细胞在子宫内膜肿瘤(如子宫内膜癌)发生发展中的作用。例如，研究发现子宫内膜上皮细胞能够通过异常增殖和侵袭来促进肿瘤的生长。这些研究有助于理解子宫内膜癌的发病机制，为开发新的治疗方法提供理论基础。

 研究人员研究了影响子宫内膜上皮细胞功能的基因和信号通路，以及它们如何响应外部刺激。例如，研究发现Wnt/β-catenin信号通路在调控子宫内膜上皮细胞的分化和增殖中起着重要作用。这些研究有助于理解子宫内膜上皮细胞功能的分子机制，为开发新的治疗策略提供理论基础。

 研究人员开发了多种体外培养方法，以维持子宫内膜上皮细胞的功能和特性。例如，研究人员利用三维培养系统来模拟子宫内膜的生理环境，以研究子宫内膜上皮细胞的生理功能和疾病机制。这些研究有助于开发新的体外模型，用于研究子宫内膜的生理功能和疾病机制。

 总体来说，人类子宫内膜上皮细胞作为一种重要的细胞模型，在研究子宫内膜生理功能、疾病发生发展和组织工程等方面发挥着关键作用。通过研究这些细胞，研究人员可以更好地理解子宫内膜的生物学功能，为治疗相关疾病和改善生育结果提供理论基础。

人子宫内膜上皮细胞标志物：

人子宫内膜上皮细胞的标志物包括Cytokeratin、E-cadherin、β-catenin、Integrinαvβ3、FGFR1、PDGFRβ、VEGFR2、ERα/β、PR和GSK-3β等。这些标志物对于识别和研究子宫内膜上皮细胞至关重要。

EEC人子宫内膜上皮细胞永生化培养操作步骤

EEC人子宫内膜上皮细胞永生化传代操作方法

到货方式：复苏细胞/T25瓶运输

收货处理

1.收到细胞后，请检查发货培养瓶的状况，是否有破损、漏液、浑浊等现象。如果有，请立即和我们联系;如果没有，请您用75%酒精消毒细胞瓶外壁，再将其置于37度培养箱静置4h。细胞密度小于80%时，请换液并让细胞瓶处于透气状态(培养基不能回收使用)。

2.静置后观察细胞状态，在显微镜下确认细胞生长状态时，最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行，能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20X物镜下，同时给刚收到的细胞拍照，(10×，20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。拍照反馈给我们。

EEC细胞传代操作步骤

传代密度：细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3.按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

4.将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

EEC细胞培养注意事项

1.运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。

2.因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

3申请售后时请提供细胞收货时及反馈售后当天细胞清晰照片及培养信息，建议客户在细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。

4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

5. 细胞在不同实验室培养由于所使用培养基及血清品牌、个人操作习惯、培养瓶品牌等诸多培养条件不尽相同，导致细胞培养形态、生长速度、贴壁情况均可能有所差异，对于此类细胞适应环境生长的行为，不予过度解释或免费售后。

EEC人子宫内膜上皮细胞永生化复苏操作步骤

到货方式：冻存细胞/1ml冻存管运输

收货处理

1.干冰运输的细胞到货，请检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2.为保证细胞的高存活率，收到产品后，请立即解冻复苏细胞，如若不能复苏请立即转入液氮冻存。

EEC细胞复苏方法

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀

在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。

然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

EEC人子宫内膜上皮细胞永生化冻存操作方法

冻存液配方：无血清冻存液，液氮储存

冻存密度

如果是有要求每管要冻多少细胞，那就用1ml完培重悬后，取部分按平时方法计数，剩下的细胞按计数需要的细胞量冻存即可。

如果没要求，那就按平时，一个皿冻一管。

EEC细胞冻存操作步骤

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例

1.收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，加1 mL血清重悬细胞，进行细胞计数。

2.根据细胞株数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x10^6~1x10^7/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

3.将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

EEC人子宫内膜上皮细胞永生化永生化冻存注意事项

冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案