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MV4-11-LUC-eGFP(人急性单核细胞白血病细胞-绿色荧光蛋白标记)

货号:IML-005 来源:atcc

规格:1x106cells/T25或1mL冻存管

形态:淋巴母细胞样,悬浮生长

培养基:IMDM+10% FBS+PS+0.5ug/ml puro

传代比例:1:2至1:3,每周 3次

培养环境:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃

MV4-11-LUC-eGFP细胞说明书

价格:¥3000

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一、细胞基本属性
细胞名称MV4-11-LUC-eGFP(人急性单核细胞白血病细胞-荧光素酶标记-绿色荧光蛋白标记)
细胞别称MV4-11-LUC-eGFP;人急性单核细胞白血病细胞-LUC-eGFP
种属来源
组织来源外周血
生长特性悬浮生长
细胞形态淋巴母细胞样
背景介绍

Luciferase MV4-11细胞稳定表达萤光蛋白。该细胞株性状稳定,培养时不需要添加抗生素维持。可用作萤光蛋白活性检测中的阳性对照,也可用于活体动物成像实验。

该细胞通过慢病毒转染的方式携带GFP基因。

MV4-11细胞系来自一名10岁男性双表型B-粒单核细胞白血病患者的母细胞,由Rovera建立。生长因子,粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)是建立该细胞系所必需的,生长因子是其在化学限定的培养基中持续增殖所必需的。
STR鉴定图谱MV4-11-LUC-eGFP.jpg
puro药筛浓度MV4-11-LUC-eGFP细胞puro药筛浓度为0.5ug/ml,培养过程中建议使用0.2ug/ml浓度puro维持
生物安全等级1
细胞规格1x106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测
保藏机构ATCC
培养基IMDM+10% FBS+PS+0.5ug/ml puro
培养条件气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件无血清冻存液,液氮储存
细胞货期2周左右
运输方式复苏发货(T25瓶免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递
供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主
  二、细胞培养操作
到货方式复苏细胞/T25瓶运输
收货处理1.收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,是否有破损、漏液、浑浊等现象。如果有,请立即和我们联系;如果没有,请您用75%酒精消毒细胞瓶外壁,再将其置于37度培养箱静置6h。
2.静置后观察细胞状态,在显微镜下确认细胞生长状态时,最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20X物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。拍照反馈给我们。
3.静置后需镜下拍照(看整体密度)
a.如密度50%以下,建议换液并竖瓶培养
b.如密度50%-80%,建议换液培养,隔天观察密度
c.如密度90%,建议传代
4.换液及传代处理前,培养瓶竖着放置至少半小时(使细胞沉到瓶底);收集上清,必须将瓶内所有培养基(70ml)全部收集!并用PBS(10ml)润洗瓶底并收集!离心转速为1000rpm,5min。
传代密度细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养
传代方法方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心3-5min分钟,弃去上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:4的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
到货方式冻存细胞/1ml冻存管运输
收货处理1.干冰运输的细胞到货,请检查干冰是否完全挥发,细胞是否解冻,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2.为保证细胞的高存活率,收到产品后,请立即解冻复苏细胞,如若不能复苏请立即转入液氮冻存。
培养皿/瓶一管细胞建议接种到6cm培养皿或者T25瓶
复苏操作1.将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。
2.在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。
3.然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。
4.第二天换液并检查细胞密度。
注意事项1.运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。
2.因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
3. 冻存细胞发货2管,客户先复苏一支,若复苏失败及时联系我方并在我方指导下复苏第二支。
4. 申请售后时请提供细胞收货时及反馈售后当天细胞清晰照片及培养信息,建议客户在细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
6. 细胞在不同实验室培养由于所使用培养基及血清品牌、个人操作习惯、培养瓶品牌等诸多培养条件不尽相同,导致细胞培养形态、生长速度、贴壁情况均可能有所差异,对于此类细胞适应环境生长的行为,不予过度解释或免费售后。
  三、细胞冻存操作
冻存液配方无血清冻存液,液氮储存
冻存密度如果是有要求每管要冻多少细胞,那就用1ml完培重悬后,取部分按平时方法计数,剩下的细胞按计数需要的细胞量冻存即可。
如果没要求,那就按平时,一个皿冻一管。
冻存方法待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例
1.收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,加1 mL血清重悬细胞,进行细胞计数。
2.根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5x106~1x107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
3.将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

售后服务

细胞重发标准

1.细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;

2.收到细胞未开封,如出现污染状况,重发;

3.收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发;

4.常温发货的细胞静置4小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后,出现污染,经核实后,重发;

5.细胞活性问题,请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发;

6.视具体情况而定。

细胞不予重发标准

1.客户操作造成细胞污染,不重发;

2.客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发;

3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;

4.细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片,不重发;

5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发;

6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发;

7.视具体情况而定。

MV4-11-LUC-eGFP(人急性单核细胞白血病细胞-绿色荧光蛋白标记)培养方法条件

细胞培养常见问题

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