人源心肌细胞（IPSC诱导心肌细胞）

货号：IMP-H184

价格：

¥9200

规格：

货号：IMP-H184

培养基：人源心肌细胞专用培养基

传代特征：心肌细胞是终末分化的功能细胞，与人体内的心肌细胞性质相同，不能增殖扩增

细胞冻存：冻存细胞存于-80℃冰箱，2周有效期；长期需液氮储存

购买咨询

产品描述

背景简介

人源心肌细胞（正常型）是一种即用型的高纯度心肌细胞产品。将诱导多能干细胞高效分化、纯化而成。心肌细胞主要由具备自主电生理活动的心室肌样细胞组成，同时也包含少量心房肌和窦房结样细胞。这些细胞表达常规的心肌特异性基因，包括多种收缩蛋白和离子通道。同时，心肌细胞具备经典的心肌细胞电生理活性，能够对电学、生物化学和机械刺激做出心肌细胞的常规反应。以电生理和钙转导信号记录为例，这些细胞可以作为新药筛选，毒理学测定和其他生理学研究的理想工具。

一、细胞基本属性
细胞名称	原代人源心肌细胞（IPSC诱导心肌细胞）
种属来源	人
产品规格	5x10⁵cells/T25或1mL冻存管
培养基	人源心肌细胞专用培养基
产品优势	高纯度人源细胞：与传统鼠源心肌细胞不同，心肌细胞是一种高纯度的体外人源细胞。严格的质检把控，确保心肌细胞纯度达95%以上。特有人类心肌细胞属性。动作电位：具备正常人类心脏的标准电生理学特征，受到电刺激后产生搏动。收缩功能：具备正常人类心脏的电收缩偶联，具备心脏特有的收缩功能，自主搏动节律接近成人窦性心律。离子通道：具备正常人类心肌细胞的绝大部分离子通道，为科学研究提供更准确的模型疾病特异型细胞通过重编程疾病特异型体细胞，例如表皮成纤维细胞及CD34+血细胞。
传代特征	心肌IPSC诱导心肌细胞是终末分化的功能细胞，与人体内的心肌细胞性质相同，不能增殖扩增
冻存细胞	冻存细胞存于-80℃冰箱，2周有效期；长期需液氮储存
产品视频
产品货期	7-8周左右
运输方式	T25培养瓶/ 顺丰快递（包邮）
供应限制	仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明	以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主
二、细胞培养操作
需要材料	1.DPBS, No Calcium, No Magnesium 2.RPMI1640 3.FBS
心肌细胞进行再接种	a.如果需要将心肌细胞按合适密度接种到新的培养皿/瓶中，可对心肌细胞进行再接种，再接种操作会导致20%左右的细胞死亡，即损失20%的细胞。 b.室温平衡心肌细胞复苏液、DPBS溶液，37℃预热心肌细胞消化液。 c.取出心肌细胞铺板液包被过的培养皿/瓶，吸去心肌细胞铺板液并加入适量心肌细胞复苏液，置于5%CO 2 的37℃恒温细胞培养箱中。 d.吸除心肌细胞培养基，加入DPBS溶液清洗一次。 e.移除DPBS，加入预热的心肌细胞消化液使之完全覆盖皿/瓶底。 f.37℃孵育3-5分钟，显微镜下观察到大部分细胞相互分离，表明达到理想的消化时间。 g.向皿/瓶中加入消化液3-5倍体积的RPMI1640+10%FBS终止消化，用枪扇形吹打培养皿/瓶底，使皿/瓶底贴附的心肌细胞脱落，将细胞转移至15ml 离心管中，再加入适量中和液冲洗皿/瓶底，收集剩余细胞加入15ml离心管中，300g离心5分钟。 I .小心移除上清，用心肌细胞复苏液重悬细胞，轻柔吹打混匀，并接种到包被过的培养皿/瓶中，十字晃动使细胞均匀分布。 II.5%CO 2 的37℃恒温培养箱中培养24-48小时后，更换为心肌细胞培养基继续培养。 III.心肌细胞需要在二氧化碳培养箱中继续培养2-8天恢复搏动；此期间心肌细胞需要每隔48h换一次心肌细胞培养基。重要提醒：吹打力度要轻柔，避免损伤细胞。亦可用心肌细胞培养基+10%FBS终止消化。
培养材料准备	心肌细胞铺板液包被培养皿/瓶：在4℃冰面上，往培养皿/瓶中添加心肌细胞铺板液至完全覆盖皿/瓶底(建议1ml/六孔板单孔)，37℃包被1小时。如果暂时不用，可用塑封膜封口后2-8℃储存，并于1周内使用，保存期间心肌细胞铺板液需始终保持完全覆盖皿底。重要提醒：操作时需要将铺板液始终置于冰上；正确操作下铺板液应呈清亮，若操作时间过长或温度过高，铺板液会变得粘稠甚至呈胶状，不宜使用。
心肌细胞复苏(适用于冻存的细胞）	a.将心肌细胞复苏液从4°C冰箱中取出，室温平衡30分钟。 b.打开水浴锅，设定温度为37°C。 c.开启生物安全柜进行紫外灭菌30分种。 d.在冰上将1ml心肌细胞铺板液加入6孔板的一个孔中(0.1ml/cm 2 )，随即前后左右晃动6孔板，使铺板液均匀覆盖孔的表面。 e.将剩余铺板液迅速放回冰箱，将6孔板放入细胞培养箱中孵育1小时。 f.取出孵育好的6孔板，放于生物安全柜中，吸除心肌细胞铺板液后，立刻在孔内加入1ml 心肌细胞复苏液。 g.从高效液氮储存罐中取出需要复苏的细胞，将其放于干冰中暂存。 h.从干冰中取出细胞，迅速将冻存管的下1/2没入水浴锅中，轻柔晃动1-2分钟至管中仅剩一小块冰时，将其取出。 i.75%酒精擦拭冻存管表面后，将其放入生物安全柜中，拧开管盖，用1ml枪尖轻柔的将管中液体尽可能多的转移至15ml离心管中，用1ml心肌细胞复苏液轻柔冲洗冻存管，以5秒钟一滴的速度将冲洗液缓慢滴加入15ml离心管，边滴加边轻柔晃动离心管。 j.再用枪尖以同样速度，滴加1ml心肌细胞复苏液至15ml离心管，边滴加边轻柔晃动离心管。 k.用移液管由慢（2秒钟一滴）到快的滴加9ml心肌细胞复苏液，同时轻柔晃动离心管。300g离心5分钟。 l.在生物安全柜内吸除上清，用2ml移液管取1ml心肌细胞复苏液轻柔吹打细胞沉淀3-5次后，将其加入6孔板中，前后左右十字晃动混匀（可按比例稀释计数）。 m.显微镜下观察，细胞均匀分布。 n.在6孔板上标记好细胞名称、日期以及操作人员后，将其放入细胞培养箱，再次前后左右晃动混匀，放入细胞培养箱种培养24-48小时至绝大多数细胞贴壁后即可换液为心肌细胞培养基。重要提醒：心肌细胞复苏计数后，可按需求接种至需要的培养容器；心肌细胞培养时，按照推荐的密度接种，能够抑制成纤维细胞生长速度；重要提醒：心肌细胞复跳后，建议继续培养1-2天稳定细胞状态。
心肌细胞维持	a.将心肌细胞培养基室温平衡30分钟。 b.将心肌细胞用心肌细胞培养基培养，每48小时换液一次。更换时，贴壁加入培养基避免刮碰细胞；亦可加入标准量150%的心肌细胞培养基，每72小时换液一次。重要提醒：细胞在6-8周内性状稳定。如果需要长期培养，为了维持细胞稳定性和纯度，需要定期采用心肌细胞纯化液进行处理,一般每6周处理一次
注意事项	1.运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 2.因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 3. 申请售后时请提供细胞收货时及反馈售后当天细胞清晰照片及培养信息，建议客户在细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。 4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。 5. 细胞在不同实验室培养由于所使用培养基及血清品牌、个人操作习惯、培养瓶品牌等诸多培养条件不尽相同，导致细胞培养形态、生长速度、贴壁情况均可能有所差异，对于此类细胞适应环境生长的行为，不予过度解释或免费售后。
三、细胞冻存操作
冻存液配方	无血清冻存液，液氮储存
冻存密度	如果是有要求每管要冻多少细胞，那就用1ml完培重悬后，取部分按平时方法计数，剩下的细胞按计数需要的细胞量冻存即可。如果没要求，那就按平时，一个皿冻一管。
冻存方法	待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例 1.收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，加1 mL血清重悬细胞，进行细胞计数。 2.根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x10⁶~1x10⁷/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。 3.将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项	冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案