常见细胞污染类型如何辨别及预防解决方法
常见细胞污染类型如何辨别及预防解决方法:细胞培养中常见的生物污染类型有7种,分别是细菌污染,支原体污染,原虫污染,黑胶虫污染,真菌污染,病毒污染以及非细胞污染,真菌污染来源,一般是来自实验服,并且具有气候性,多雨······
发布时间:2024-06-18 10:17:56 细胞资源库平台 访问量:181
HEY细胞来源于欧洲女性患者高级别卵巢浆液性腺癌异种移植物(HX-62),其最初生长于卵巢中分化乳头状囊腺癌患者的腹膜沉积物。HEY细胞显示出在半固体培养物中生长的不同能力,并可以在免疫缺失的CBA/CJ小鼠中异种移植。HEY细胞显示出对顺式铂有一定程度的抗性。
HEY人卵巢癌细胞培养实验准备
提前开启紫外照射30min消毒灭菌,工作台开灯通风10min,用75%酒精擦拭台面。
器材耗材:玻璃瓶、培养瓶、培养皿、巴士管、离心管、移液枪、枪头(白色0-10ul;黄色20-200ul;蓝色100-1000ul)、滤器、吸管、多孔培养皿、6cm皿、10cm皿,培养瓶等。
试剂:DMEM培养液、缓冲液、PBS、消化液、血清、抗生素。
操作者工作范畴
无菌操作:洗手,戴手套,穿实验服,常喷 75%酒精
形态特性:上皮细胞样,贴壁生长
细胞培养基:DMEM+10% FBS+PS
生长条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
传代方法:1:2至1:3,每周2-3次
冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
1)HEY人卵巢癌细胞复苏方法
将含有1 mLHEY细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀
在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀
然后将所有HEY细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL完全培养基,培养过夜)
第三天换液并检查细胞密度
2)HEY人卵巢癌细胞传代方法
如果HEY细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b.加入0.25%Trypsin-0.02% EDTA消化液于培养瓶中(T25瓶1-2ml,T75瓶2-3ml),使消化液浸润所有HEY细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加3-4ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
c.将细胞悬液按1:2比例分到新的含6-8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
3)HEY人卵巢癌细胞冻存方法
待HEY细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例
a.收集HEY细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b.根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c.将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
hey细胞消化多久?
HEY人卵巢癌细胞培养箱消化2分钟左右。不同的胰酶品牌消化时间不同,以实际为主。
hey细胞几天能长好?
hey细胞倍增时间~30小时,一分二的话,一般2天左右可以传代。
1970年始,迄今为止,关于人卵巢癌细胞(HEY)的文献已有393篇。
在pubmed数据库中用“hey cell line”搜索该关键词,第一篇为1970年C S Crumpacker在J Virol.发表的“Adenovirus type 2-simian virus 40 hybrid population: evidence for a hybrid deoxyribonucleic acid molecule and the absence of adenovirus-encapsidated circular simian virus 40 deoxyribonucleic acid”。
人卵巢癌细胞系(HEY)是研究卵巢癌的关键模型,被广泛应用于癌症生物学、药物研发和肿瘤治疗策略的探索,包括药物敏感性、耐药机制、细胞周期调控、信号通路研究以及免疫治疗策略的评估等。
研究人员利用HEY细胞研究其遗传特性(不稳定性)。可以帮助研究人员更好地理解卵巢癌的发病机制,并为开发治疗方法提供重要信息。
当卵巢癌细胞系植入裸鼠时,无论是皮下、腹膜腔内还是卵巢囊内,它们的生长能力各不相同。
学者常利用HEY细胞的耐药机制开发新的治疗方法,通常研究人员会建立了一个从一种对顺铂敏感的父细胞系中发展而来的抗顺铂的人类卵巢癌细胞系。该细胞系对药物和放射线的抗性表明它可能成为研究铂类化合物的有效工具。
HEY细胞在卵巢癌研究中具有广泛的应用,可用于多种实验,包括增殖实验、成球实验、自噬、磷酸化、神经炎症、迁移、代谢组学相关实验、凋亡和增殖抑制等。
人卵巢癌细胞(如HEY细胞)的标志物包括CD10、CD133、CD44、CA-125、Cyclin D1、p53、KIT、PD-L1和BMI1等。这些标志物有助于识别和研究卵巢癌细胞。
常见细胞污染类型如何辨别及预防解决方法:细胞培养中常见的生物污染类型有7种,分别是细菌污染,支原体污染,原虫污染,黑胶虫污染,真菌污染,病毒污染以及非细胞污染,真菌污染来源,一般是来自实验服,并且具有气候性,多雨······
细胞聚团的原因分析及如何避免:培养物中细胞可能聚集的一些原因包括:1.过度消化、2.环境压力、3.组织分解、4.过度生长、5.污染等;如何避免聚团细胞的生成;首先确认当前细胞生长密度及状态,80%左右的生长密度即可进行······
细胞有空泡原因分析及解决方法:出现细胞空泡情况有1.细胞老化2.培养液错误配制;3.细胞消化时操作不当;4.污染等等,如细胞老化,解决方法,原代细胞使用较低代次进行实验,传代细胞避免传代次数过高···
细胞半换液和全换液操作步骤:第一种方式:细胞全换液;如果是贴壁细胞,可以用全量换液法,直接吸去全部旧培养基,补充足量新鲜完全培养基;第二种方式:细胞半换液;"细胞半换液"又称"细胞半量换液",即弃掉一半旧的培养基,再······
细胞生长缓慢的可能原因有哪些:细胞培养外部因素包括细胞培养基的配方和质量问题,培养条件不理想,污染问题,细胞自身因素包含细胞的健康状态,细胞密度过高或过低,细胞老化现象,细胞特性,当细胞生长出现缓慢的问题时,我······
常用胰腺癌细胞株动物模型及胰腺癌细胞株有哪些:胰腺癌研究中常用的动物模型主要包括化学物质诱导胰腺癌动物模型,基因工程胰腺癌小鼠模型和胰腺癌移植模型,常用的胰腺细胞株MIA-PACA-2人胰腺癌细胞,Capan-2人胰腺癌细······
产品规格:1*10^6
¥3000
产品规格:1*10^6
¥3000
产品规格:1*10^6
¥3000
产品规格:1*10^6
¥3000
上一篇:探索磁性多层软体机器人,用于按需靶向粘附,治疗胃溃疡