复方RMY-205对SARS-CoV-2核衣壳蛋白诱导的肺纤维化的治疗效力

基本信息

英文标题：rapeutic potency of compound RMY-205 for pulmonary fibrosis induced by SARS-CoV-2 nucleocapsid protein

中文标题：复方RMY-205对SARS-CoV-2核衣壳蛋白诱导的肺纤维化的治疗效力

发表期刊：《Cell Chemical Biology》

影响因子：8.6

作者单位：厦门大学生命科学学院细胞应激生物学国家重点实验室、厦门大学药学院福建省创新药物靶点研究重点实验室

作者信息：Zhi-yuan Zhang, Cui-yu Ju, Liu-zheng Wu,et al.

研究背景

肺纤维化是COVID-19的一个典型后遗症，与COVID-19患者的预后不良相关。然而，SARS-CoV-2引起的肺纤维化的潜在机制尚不清楚。本研究展示了SARS-CoV-2的核衣壳(N)蛋白通过激活肺成纤维细胞来诱导肺纤维化。

研究方法

通过在肺成纤维细胞HFL-1细胞中转染不同的SARS-CoV-2结构和非结构蛋白，展示了SARS-CoV-2编码的N蛋白是唯一能够诱导纤维化的蛋白。通过体内外实验，研究了N蛋白与TbRI的相互作用及其对TGF-β/Smad信号通路的影响，并筛选出了能够直接靶向Smad3以阻断N蛋白诱导的纤维化的化合物RMY-205。

实验结果

Pulmonary fibrosis是COVID-19的一种典型后遗症。张等人证明，SARS-CoV-2的核壳蛋白(N)通过激活TbRI-Smad信号通路在肺纤维化细胞中诱导肺纤维化。此外，他们还确定了一种化合物RMY-205，可以抑制N蛋白激活的Smad3，对于N蛋白诱导的肺纤维化具有很好的治疗潜力。

N蛋白在HFL-1细胞中表达与肺纤维化相关，影响α-SMA和COL1A1的表达以及胶原的分泌。

在小鼠模型中，N蛋白诱导α-SMA和胶原的沉积，并通过Ashcroft评分评估纤维化程度。

检测了巨噬细胞和中性粒细胞的浸润，并通过Western blot验证了Smad2和Smad3的磷酸化。

N蛋白与TbRI结合，激活TGF-β/Smad信号通路。

检测了N蛋白与TbRI、TbRII、FKBP12和Smad2/3的相互作用。

观察了N蛋白对α-SMA和COL1A1的表达以及TbRI(T204位点)磷酸化的影响。

检测了TbRI的聚合作用以及N蛋白与TbRI聚合体的相互作用。

RMY-205药物通过干扰N蛋白增强的Smad3-TbRI相互作用，治疗肺纤维化。

检测了RMY-205对α-SMA和COL1A1的表达以及胶原的分泌的影响。

观察了RMY-205对Smad2/3的磷酸化和定位的影响。

RMY-205与Smad3的MH1域的相互作用，通过分子对接和点突变实验进行验证。

RMY-205通过Smad3抑制细胞因子的分泌，治疗肺纤维化。

检测了Smad3在细胞中的定位和磷酸化水平。

观察了N蛋白诱导的转录活性以及RMY-205对细胞因子和趋化因子的mRNA水平的影响。

RMY-205在体内实验中对肺纤维化具有良好的治疗作用。

检测了α-SMA和COL1A1的表达、细胞因子和趋化因子的mRNA和蛋白水平以及免疫细胞的招募。

观察了病理学评分和组织染色评估的RMY-205对肺纤维化的治疗作用。

RMY-205对不同N蛋白变异体诱导的肺纤维化具有良好的治疗作用。

检测了α-SMA和COL1A1的表达以及胶原的沉积，并通过Ashcroft评分评估纤维化程度。

观察了免疫细胞的浸润情况，并通过Western blot验证了RMY-205对不同N蛋白变异体的治疗作用。

N蛋白通过与TbRI的相互作用，破坏了TbRI与FKBP12的结合，导致TbRI聚合和自磷酸化，从而激活TGF-β/Smad信号通路，促进肺纤维化。此外，化合物RMY-205能够结合Smad3，阻断N蛋白诱导的Smad3激活，展现出良好的治疗潜力。

研究结论

本研究强调了N蛋白诱导的肺纤维化的信号通路，并展示了通过靶向Smad3的化合物RMY-205治疗肺纤维化的新策略。此外，RMY-205在小鼠模型中展现出了治疗N蛋白诱导的肺纤维化的潜力，并且具有良好的药代动力学特性，表明其作为口服药物的潜力。