大鼠肺动脉平滑肌细胞分离试剂盒

产品描述

肺动脉起于右心室，在主动脉之前向左上后方斜行，在主动脉弓下方分为左、右肺动脉，经肺门入肺。由于肺动脉连接着输送静脉血的右心室，所以，肺动脉虽然是动脉，但是它却输送静脉血。血管平滑肌细胞互相连接，形成管状结构;在功能上可以通产生连续收缩，使器官对抗所加负荷而保持原有的形状。该细胞所表达的钙通道表面表达的ICAM-1和VCAM-1，参与血管壁炎症反应。体外培养的肺大动脉平滑肌细胞呈梭形、星形或不规则形。本试剂盒主要通过酶消化法进行大鼠肺动脉平滑肌细胞的原代提取。

适用范围

本试剂盒适用于分离wistar、SD等不同品系的大鼠提取大鼠肺动脉平滑肌细胞。

规格

本试剂盒规格为5次(提取2只大鼠为1次计)。

运输和存储条件

2-8 ℃保存与运输，保质期为参考下表，所有组分开封后，有效期为6-8周。

试剂盒组成信息

表1. 分离培养试剂盒组成信息

分离步骤

实验前准备：大鼠肺动脉平滑肌细胞分离试剂盒;实验需自备手术器械(提前高温灭菌)、6孔/6 cm/10 cm培养皿、离心管若干。以下以2只SD大鼠为例：

第一天：

1. 大鼠颈椎脱臼处死后，用酒精喷洒大鼠胸腹部，充分消毒，在胸腹部做切口，切开皮肤暴露大鼠心、肺，从心脏处找到主动脉与肺动脉缠绕处，小心分开二者并沿着分支取下肺动脉，转移至含有预冷的大鼠肺动脉组织处理缓冲液的6 cm培养皿中。用眼科弯镊去除结缔组织、脂肪、血块等，在预冷的大鼠肺动脉组织处理缓冲液中漂洗3次。

2. 将清洗干净的肺动脉组织转移至预冷的大鼠肺动脉组织处理缓冲液中，将肺动脉沿管壁剪开暴露内腔，并剪成小组织块。

3. 转移组织块至含有3 mL大鼠肺动脉组织消化液的15 mL离心管中，37℃培养箱中消化过夜。

第二天：

1. 待组织块已消化完全，300 g，离心5min，弃上清，用2 mL大鼠肺动脉平滑肌细胞专用培养基重悬细胞沉淀。

2. 计数，2×104 cells/cm2的细胞密度接种于六孔板中，37℃，5%CO2的条件下培养，贴壁后更换培养基。注：2-3天左右细胞部分贴壁。

注意事项

1. 建议全程分离操作过程在冰上进行，可提高细胞活性。

2. 试剂盒内各组分中含有微生物生长所需的营养成分，请在超净工作台内打开，按照所需要量分装，并且用封口膜封住瓶口，即取即用，以避免污染。