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ATCC细胞培养
心肌纯化培养基是一种用于纯化心肌细胞(CM)的无血清、无动物源成分的培养基,根据心肌细胞对某些信号通路的高耐受性,选择性去除非心肌细胞,可适用于纯化多能干细胞来源心肌细胞,纯化效率高达95%。
表1. 心肌纯化培养基相关信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 储存 |
| IMI-CM01PM | 心肌纯化基础培养基 | 490 mL | 2℃-8℃,12个月 |
| 纯化补充剂(50X) | 10ml | -20℃,6个月 |
表2. 推荐试剂&材料
| 试剂&材料 | 品牌(e.g.) | 货号(e.g.) |
| Y-27632 | - | IMC-014-Y |
| 心肌细胞消化液 | - | IMI-M001X |
| 心肌细胞维持培养基 | - | IMI-CM01M |
| PBS | - | IMC-401 |
| 6孔细胞培养板 | NEST | N/A |
| 15mL/50mL离心管 | 硕华生物 | N/A |
| 10 μL/200 μL/1000 μL无菌吸头 | 佳顺生物 | N/A |
| 10mL/50mL移液管 | NEST | N/A |
| Matrigel | Coming | 354277 |
| Human Laminin 521 Protein(RG) | 恺卡生物 | LMN-HM521 |
| 0.25%胰蛋白酶消化液(含EDTA,含酚红) | - | IMC-501 |
使用方法(以6孔板1个孔为例)
(1) 收获心肌细胞后,将CM使用2 mL心肌细胞维持培养基(含10μM IMC-014-Y)以实验所需密度接种于基质胶或laminin 521等基底包被的六孔板(1孔)中培养过夜。
(2) 24h后,弃去心肌细胞维持培养基,加入1 mL PBS洗去残留培养基,
(3) 加入2 mL心肌纯化培养基,每2-3天换一次液,视纯化情况(镜下观察形态不一致细胞)进行培养,一般可纯化2-4天。
(4) 当纯化结束时,弃去心肌纯化培养基,可每孔加入2 mL心肌细胞维持培养基继续培养,或加入消化液收集细胞,进行后续实验。
注意:①当镜下观察不到非心肌细胞时,可停止纯化,停止纯化后需恢复至少4天以上才能观察到大量细胞跳动。
②心肌细胞复苏、维持培养、消化接种等操作见《心肌细胞iCM-H1维持培养基使用说明(IMI-CM01M)》。
③当心肌细胞纯度过低,例如小于30%%时,可适当延长纯化时间。但是纯度过低时进行纯化其纯化效率难以达到95%以上。
产品规格:1*10^6
¥2000
产品规格:1*10^6
¥1200
产品规格:1*10^6
¥1500
产品规格:1*10^6
¥1200