小鼠肺组织组织消化液

产品描述

小鼠肺组织消化液是专为小鼠肺组织单细胞分离制备研发的复合型酶消化试剂，针对肺组织疏松结缔组织、肺泡间质、血管包膜等组织结构特性优化配方，可温和、高效分解肺组织中的胶原蛋白、弹性蛋白、细胞间质等成分，最大程度解离组织块，同时降低酶体系对肺上皮细胞、免疫细胞、间质细胞的损伤，保留细胞活性与表面抗原完整性。本产品无菌配制、杂质含量低、消化稳定性强，适配各类小鼠正常肺组织或病变肺组织(炎症、纤维化、肿瘤模型)原代细胞提取、流式细胞术检测、细胞功能实验等科研场景。

产品信息

表1. 试剂盒组成信息

实验操作

1) 样本预处理：无菌条件下剥离小鼠完整肺组织，用预冷无菌PBS冲洗组织表面血污，去除气管、血管、多余脂肪及坏死组织，再次用PBS洗涤2次，去除残留血细胞与杂质。

2) 组织消化：准备好50 mL离心管，将漂洗干净的组织放入50 mL离心管内，将肺组织剪碎至1 mm³左右的细小组织碎块，加入5 mL缓冲液(含有2%FBS的PBS)和5 mL小鼠肺组织消化液，充分浸没组织碎块，置于37℃、5% CO₂培养箱的摇床80 rpm上温和振荡消化，消化时长1 h。根据组织软化、呈絮状状态、悬液明显浑浊适时终止消化。

3) 终止消化与过滤：消化完成后，加入20 mL 2%FBS的PBS终止酶活性，轻轻反复吹打混悬细胞。将70 μm筛网置于新的50 mL管，去除未消化的组织残渣。使用2 mL注射器活塞研磨筛网上的组织，当组织被完全研磨开后不要在筛网上再过度研磨;添加缓冲液再过滤，视筛网上残留组织情况决定是否研磨，一般重复过滤两次即可完成。;

4) 细胞裂红：过滤后的细胞悬液300 g离心3min后，弃上清，3 mL视情况或更多红细胞裂解液破红5-10 min，补充缓冲液至30mL左右，400g 5min离心，取细胞沉淀。

5) 收集细胞：用无菌培养基或PBS重悬细胞，即可用于后续细胞分离培养、流式检测等实验。(如需分免疫细胞可以进一步进行Ficoll分离操作)

注意事项

1. 本产品为无菌产品，应注意无菌操作，避免污染。

2. 本产品解冻后建议适当分装并冻存，反复冻融会影响消化液的消化效果。

3. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5. 根据实际的实验需求，可以用红细胞裂解液或者Ficoll进行分离纯化细胞。