常见细胞污染类型如何辨别及预防解决方法
常见细胞污染类型如何辨别及预防解决方法:细胞培养中常见的生物污染类型有7种,分别是细菌污染,支原体污染,原虫污染,黑胶虫污染,真菌污染,病毒污染以及非细胞污染,真菌污染来源,一般是来自实验服,并且具有气候性,多雨······
发布时间:2026-03-06 09:14:17 细胞资源库平台 访问量:61
GL-261-FLUC-puro小鼠胶质细胞瘤是源自 C57BL/6 小鼠的经典胶质细胞瘤细胞系 GL-261 经慢病毒双标记改造的稳定株,原始细胞由 3 - 甲基胆蒽诱导建立,携带 TP53 与 KRAS 突变,高度模拟人胶质母细胞瘤的恶性表型;通过整合荧光素酶(FLUC)与嘌呤霉素(puro)抗性基因,可实现活体无创生物发光成像实时示踪颅内肿瘤生长、侵袭与药物响应,同时借助嘌呤霉素快速筛选稳定传代株。基于该细胞构建的免疫健全 C57BL/6 小鼠原位胶质细胞瘤模型,能完整保留肿瘤免疫微环境与宿主免疫应答,精准再现人胶质母细胞瘤的侵袭性、病理特征及治疗抵抗特性,为胶质瘤发病机制解析、免疫治疗评价、化疗药物筛选及疗效动态监测提供了稳定、可靠且高度临床相关的临床前研究平台,是推动胶质母细胞瘤基础研究向临床转化的关键工具。
细胞名称:GL-261-FLUC-puro小鼠胶质细胞瘤(FLUC标记)(STR鉴定正确)
种属来源:小鼠
组织来源:胶质瘤
生长特性:贴壁生长
细胞形态:成纤维细胞样
背景介绍:Luciferase GL-261细胞稳定表达萤火虫荧光素酶。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照,也可用于活体动物成像实验。该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。其亲本株是经典小鼠源性胶质细胞瘤细胞系,最初通过3‑甲基胆蒽颅内诱导 C57BL/6 小鼠建立,经同系小鼠体内连续传代后于上世纪 90 年代中期建系;该细胞携带KRAS 与 TP53 突变,具有高侵袭性、高致瘤性,可稳定表达胶质细胞相关标志物,在免疫健全小鼠体内能高度模拟人胶质母细胞瘤的病理特征、侵袭行为与肿瘤微环境,是目前胶质瘤发病机制、免疫治疗与药物筛选研究中应用最广泛的同基因原位模型亲本细胞。
puro药筛浓度:GL-261-FLUC-puro细胞puro药筛浓度为1.0ug/ml,培养过程中建议使用0.5ug/ml puro维持
培养须知:首次复苏或长期未用嘌呤霉素时,建议用含嘌呤霉素的培养基培养24-48小时以清除非抗性细胞。建议定期备份低代次细胞,并记录荧光素酶活性数据以确保实验一致性。如有特殊需求(如无血清培养),需逐步驯化并验证基因稳定性。双标记(FLUC+Puro)确保长期基因稳定性,但需持续筛选压力。
| 接种方式 | 推荐接种密度 | 成瘤速度 | 成瘤特点 | 优势 | 局限性 | 适用场景 |
| 颅内立体定位注射 | 1×10⁵细胞/ 只(体积5-10μL) | 17-21天 | 原位成瘤,高度模拟临床胶质瘤侵袭性、浸润性生长,与脑组织交互真实 | 最接近临床病理、免疫微环境完整,可活体荧光成像监测 | 手术难度高、创伤较大、操作耗时 | 胶质瘤发病机制、免疫治疗、原位药物评价 |
| 皮下接种(背部/腋下) | 5×10⁵-5×108细胞 / 只 | 10-14天 | 形成边界较清晰的实体瘤,生长均一、易测量体积 | 操作简单、成瘤稳定、可重复、便于动态监测肿瘤大小 | 非脑内微环境、无侵袭性、免疫环境差异大 | 初步药效筛选、细胞致瘤性验证、给药方式摸索 |
| 尾静脉注射 | 2-5×10⁸细胞 / 只 | 21-28天 | 以全身转移灶为主,颅内转移率低且随机性强 | 可模拟肿瘤血行转移 | 成瘤不稳定、靶向性差、不适合标准胶质瘤模型 | 转移机制研究、循环肿瘤细胞相关探索 |
| 产品货号 | 细胞系 | 来源小鼠 | 免疫背景 | 标记/抗性 | 成瘤部位 | 推荐接种量 | 成瘤时间 | 成瘤特点 | 优势 | 适用研究 |
| IML-083 | GL-261-FLUC-puro | C57BL/6诱导胶质瘤 | C57BL/6 | Fluc+Puro | 颅内/ 皮下 | 颅内:1×105 皮下:5×105~5×108 | 颅内 :17-21 d | 侵袭性强、浸润生长、免疫微环境完整,可活体成像 | 免疫健全模型、致瘤稳定、便于活体示踪 | 免疫治疗 、原位药效 、侵袭机制 |
| IM-M084 | GL-261(野生型) | C57BL/6诱导胶质瘤 | C57BL/6 | 无标记 | 颅内/ 皮下 | 同标记株 | 同标记株 | 成瘤行为与标记株基本一致,无活体成像 | 无外源基因干扰、成本低 | 基础致瘤性、化疗筛选 |
| IM-M172 | CT-2A | C57BL/6自发胶质瘤 | C57BL/6 | 多无标记 | 颅内/ 皮下 | 颅内:1×105 | 21-28 d | 侵袭性中等,生长相对均一,免疫原性略低 | 生长慢、便于长期观察 | 免疫调控 、慢毒药物评价 |
| IM-H211 | U87 -MG(人源) | 人胶质母细胞瘤 | 无免疫匹配 | 常用Fluc/GFP | 裸鼠颅内/ 皮下 | 颅内:2×105 | 21-30 d | 成瘤快,但为免疫缺陷模型 | 模拟人肿瘤基因组 | 人源肿瘤特性 、分子机制 |
| 影响因素 | 关键参数/条件 | 对成瘤的影响 | 建议优化方案 |
| 细胞状态 | 细胞代数、活力、汇合度 | 代数过高、活力低→成瘤率下降、生长变慢 | 选用P3~P10代细胞;台盼蓝活力**≥90%**再接种 |
| 荧光素酶标记 | Luc表达强度、稳定性 | 标记弱/不稳定→成像信号弱、易丢失 | 接种前用嘌呤霉素加压1~2代,保证Luc稳定 |
| 接种部位 | 颅 内 / 皮 下 / 尾静脉 | 颅内:侵袭性强、微环境真实;皮下:易操作、成瘤均一 | 机制/免疫治疗用颅内;初筛用皮下 |
| 接种密度 | 颅内:5×105 皮下:5×105~5×108 | 密度过低→成瘤慢、不均一;过高 →小鼠过早死亡 | 颅内5×105/5~10 μL;皮下5×105~5×10°/100 μL |
| 小鼠品系 | C57BL/6免疫健全 | 免疫缺陷鼠成瘤更快,但丧失免疫微环境 | 优先C57BL/6;对照可用裸鼠 |
| 小鼠周龄 | 6 ~ 8 周 | 周龄太小→耐受差;太大→免疫差异大 | 统一使用6~8周龄雌性小鼠 |
| 操作与注射 | 定位精度、速度、渗漏 | 渗漏、位置偏差→成瘤失败/信号异常 | 立体定位注射,缓慢推注,留针5~10min |
| 细胞悬液 | 溶剂、时间、温度 | PBS/生理盐水放置过久→活力下降 | 现配现用,冰上操作,30 min内完成接种 |
| 术后护理 | 镇痛、保温、感染 | 应激大、感染→死亡率升高 | 术后保温,必要时给予镇痛 |
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