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GL-261-FLUC-puro小鼠胶质细胞瘤皮下成瘤验证

发布时间:2026-03-06 09:14:17 细胞资源库平台 访问量:61

GL-261-FLUC-puro小鼠胶质细胞瘤是源自 C57BL/6 小鼠的经典胶质细胞瘤细胞系 GL-261 经慢病毒双标记改造的稳定株,原始细胞由 3 - 甲基胆蒽诱导建立,携带 TP53 与 KRAS 突变,高度模拟人胶质母细胞瘤的恶性表型;通过整合荧光素酶(FLUC)与嘌呤霉素(puro)抗性基因,可实现活体无创生物发光成像实时示踪颅内肿瘤生长、侵袭与药物响应,同时借助嘌呤霉素快速筛选稳定传代株。基于该细胞构建的免疫健全 C57BL/6 小鼠原位胶质细胞瘤模型,能完整保留肿瘤免疫微环境与宿主免疫应答,精准再现人胶质母细胞瘤的侵袭性、病理特征及治疗抵抗特性,为胶质瘤发病机制解析、免疫治疗评价、化疗药物筛选及疗效动态监测提供了稳定、可靠且高度临床相关的临床前研究平台,是推动胶质母细胞瘤基础研究向临床转化的关键工具。

细胞简介

细胞名称:GL-261-FLUC-puro小鼠胶质细胞瘤(FLUC标记)(STR鉴定正确)

种属来源:小鼠

组织来源:胶质瘤

生长特性:贴壁生长

细胞形态:成纤维细胞样

背景介绍:Luciferase GL-261细胞稳定表达萤火虫荧光素酶。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照,也可用于活体动物成像实验。该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。其亲本株是经典小鼠源性胶质细胞瘤细胞系,最初通过3‑甲基胆蒽颅内诱导 C57BL/6 小鼠建立,经同系小鼠体内连续传代后于上世纪 90 年代中期建系;该细胞携带KRAS 与 TP53 突变,具有高侵袭性、高致瘤性,可稳定表达胶质细胞相关标志物,在免疫健全小鼠体内能高度模拟人胶质母细胞瘤的病理特征、侵袭行为与肿瘤微环境,是目前胶质瘤发病机制、免疫治疗与药物筛选研究中应用最广泛的同基因原位模型亲本细胞。

puro药筛浓度:GL-261-FLUC-puro细胞puro药筛浓度为1.0ug/ml,培养过程中建议使用0.5ug/ml puro维持

培养须知:首次复苏或长期未用嘌呤霉素时,建议用含嘌呤霉素的培养基培养24-48小时以清除非抗性细胞。建议定期备份低代次细胞,并记录荧光素酶活性数据以确保实验一致性。如有特殊需求(如无血清培养),需逐步驯化并验证基因稳定性。双标记(FLUC+Puro)确保长期基因稳定性,但需持续筛选压力。

不同接种方式成瘤特性对比表(仅供参考)

接种方式推荐接种密度成瘤速度成瘤特点优势局限性适用场景
颅内立体定位注射1×10⁵细胞/ 只(体积5-10μL)17-21天原位成瘤,高度模拟临床胶质瘤侵袭性、浸润性生长,与脑组织交互真实最接近临床病理、免疫微环境完整,可活体荧光成像监测手术难度高、创伤较大、操作耗时胶质瘤发病机制、免疫治疗、原位药物评价
皮下接种(背部/腋下)5×10⁵-5×108细胞 / 只10-14天形成边界较清晰的实体瘤,生长均一、易测量体积操作简单、成瘤稳定、可重复、便于动态监测肿瘤大小非脑内微环境、无侵袭性、免疫环境差异大初步药效筛选、细胞致瘤性验证、给药方式摸索
尾静脉注射2-5×10⁸细胞 / 只21-28天以全身转移灶为主,颅内转移率低且随机性强可模拟肿瘤血行转移成瘤不稳定、靶向性差、不适合标准胶质瘤模型转移机制研究、循环肿瘤细胞相关探索

同类细胞系成瘤差异(仅供参考)

产品货号细胞系来源小鼠免疫背景标记/抗性成瘤部位推荐接种量成瘤时间成瘤特点优势适用研究
IML-083GL-261-FLUC-puroC57BL/6诱导胶质瘤C57BL/6Fluc+Puro颅内/ 皮下

颅内:1×105

皮下:5×105~5×108

颅内 :17-21 d侵袭性强、浸润生长、免疫微环境完整,可活体成像免疫健全模型、致瘤稳定、便于活体示踪免疫治疗 、原位药效 、侵袭机制
IM-M084GL-261(野生型)C57BL/6诱导胶质瘤C57BL/6无标记颅内/ 皮下同标记株同标记株成瘤行为与标记株基本一致,无活体成像无外源基因干扰、成本低基础致瘤性、化疗筛选
IM-M172CT-2AC57BL/6自发胶质瘤C57BL/6多无标记颅内/ 皮下颅内:1×10521-28 d侵袭性中等,生长相对均一,免疫原性略低生长慢、便于长期观察免疫调控 、慢毒药物评价
IM-H211U87 -MG(人源)人胶质母细胞瘤无免疫匹配常用Fluc/GFP裸鼠颅内/ 皮下颅内:2×10521-30 d成瘤快,但为免疫缺陷模型模拟人肿瘤基因组人源肿瘤特性 、分子机制

LLC-NLUC-puro成瘤关键影响因素

影响因素关键参数/条件对成瘤的影响建议优化方案
细胞状态细胞代数、活力、汇合度代数过高、活力低→成瘤率下降、生长变慢选用P3~P10代细胞;台盼蓝活力**≥90%**再接种
荧光素酶标记Luc表达强度、稳定性标记弱/不稳定→成像信号弱、易丢失接种前用嘌呤霉素加压1~2代,保证Luc稳定
接种部位颅 内 / 皮 下 / 尾静脉颅内:侵袭性强、微环境真实;皮下:易操作、成瘤均一机制/免疫治疗用颅内;初筛用皮下
接种密度

颅内:5×105

皮下:5×105~5×108

密度过低→成瘤慢、不均一;过高 →小鼠过早死亡颅内5×105/5~10 μL;皮下5×105~5×10°/100  μL
小鼠品系C57BL/6免疫健全免疫缺陷鼠成瘤更快,但丧失免疫微环境优先C57BL/6;对照可用裸鼠
小鼠周龄6 ~ 8 周周龄太小→耐受差;太大→免疫差异大统一使用6~8周龄雌性小鼠
操作与注射定位精度、速度、渗漏渗漏、位置偏差→成瘤失败/信号异常立体定位注射,缓慢推注,留针5~10min
细胞悬液溶剂、时间、温度PBS/生理盐水放置过久→活力下降现配现用,冰上操作,30 min内完成接种
术后护理镇痛、保温、感染应激大、感染→死亡率升高术后保温,必要时给予镇痛


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