293T细胞是什么细胞

hek293t是什么细胞

人胚肾细胞293细胞插入SV40 T-抗原基因后产生的高转染效率的衍生株称为293T。该细胞最初的名字是293tsA1609neo，293T细胞还表达E1A蛋白，SV40 large T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。293T细胞容易转染，用磷酸钙、PEI或脂质体转染，效率均可达90%以上。除用于基因表达及蛋白生产外，还用于慢病毒、逆转录病毒及腺病毒的包装。

HEK293细胞中转入SV40大T抗原基因形成的衍生株，即为HEK293T 细胞系。这使得包含SV40复制起始点的质粒能够在该细胞系中显著扩增，从而促进表达载体的扩增和蛋白质表达。HEK293T细胞能同时表达SV40大T抗原。有些含 SV40病毒的复制起始点(如pcDNA31)真核表达载体，能够在表达SV40病毒T抗原的细胞系中复制，作为基因治疗的病毒基因载体，常用于腺病毒生产。293T细胞容易转染，用磷酸钙、PEI或脂质体转染，效率均可达90%以上。

HEK293T细胞除了可用于各类基因表达及蛋白质生产，还可用于高滴度逆转录病毒及其他病毒包装，如腺病毒、慢病毒等。

hek293t是什么细胞图片

293T人胚肾细胞特点

1.细胞贴壁较弱

细胞贴壁比较弱，因此在遇到运输低温及震荡、室温静置太长时间、添加的培养基或其他试剂过冷、密度较高、聚集未吹散、加液吹打到细胞面等情况时会出现明显的成片脱落现象，此时若脱落现象不严重应尽快放回培养基继续培养，若呈大片脱落的情况时需要收集细胞重新消化吹散并接种;

建议使用经过包被或者高贴壁培养瓶培养细胞，尽量避免接触低温或密度过高;

2.细胞本身偏嗜酸性，消耗培养基较快

细胞在略微偏酸性的环境下生长状态会比偏碱性的好，注意培养基pH控制;

细胞密度达到70%以上时，培养基消耗会很快，主意及时观察并换液;

3.细胞生长聚集成岛状

细胞呈岛状聚集生长，逐步向外侧扩散直至完全融合;

4.细胞聚团后很难再吹散

细胞传代过程中一定要注意吹散细胞，接种密度不要过高，否则接种后细胞聚团将很难再吹散，会形成类似球状的聚集体贴壁生长，培养条件合适的情况下细胞会逐渐摊开生长，但若培养条件无法有效促进细胞贴壁，可能会长时间呈球状增殖。

HEK293 与 HEK293T 比较

HEK293T 细胞是HEK293细胞最广泛使用的衍生物之一，是通过将温度敏感的 SV40 T 抗原突变体整合到原始 HEK293 细胞基因组中而创建的。当转染到 293-T 细胞中时，T 抗原的表达允许具有 SV40 复制起点的质粒进行复制，从而导致重组蛋白产量增加。

293T人胚肾细胞特点

a.细胞贴壁能力比较弱：293T细胞是贴壁细胞，但其贴壁能力比较弱，容易出现明显的成片脱落现象。比如：运输低温及震荡、在室温条件下静置时间过长、添加的培养基或其他试剂温度过低、培养时细胞密度过高、细胞聚集时未吹散、加液吹打时触碰了细胞表面等。

若脱落现象不严重应将细胞尽快放回培养基继续培养，若出现大片脱落的现象需要收集细胞重新消化吹散再接种。

b.细胞本身偏嗜酸性，培养基消耗较快;293T细胞在略偏酸性的环境下生长状态更好，在培养过程中需要时刻注意培养基的pH值。在细胞密度达到70%以上时，细胞培养基的消耗速度较快，需要时刻观察并及时换液。

c.细胞生长时聚集成岛：293T细胞生长时呈岛状聚集生长，会逐步向外扩散直到完全融合。

d.细胞聚集成团之后很难再吹散：293T细胞传代过程中一定要注意吹散细胞，同时接种的密度不可过高。密度过高容易使细胞抱团，导致难以再次吹散，会在培养器皿中形成类似于球状的聚集体贴壁生长。导致即使培养条件合适细胞也难以生长。

293T细胞优势

1.具有一致的结果和细胞具有高度可重复性。

2.可以高效地大量生产重组蛋白，使其成为新药开发的主流贡献者。

3.可用于稳定和瞬时基因表达。

4.HEK 293 细胞对转染有明显的反应，并且可以在转染中使用不同的化学和物理方法。

293T细胞的主要特性

转染效率高

293T细胞表达SV40大T抗原，并含有SV40复制起始点与启动子区的质粒，这些特征使得它们能够在体外高效地转染外源基因。这种细胞因此成为了研究基因功能的强大工具。HEK293T细胞与HEK293细胞一样，容易通过磷酸钙、PEI或脂质体等方法进行转染，转染效率可达90%以上。

适用于大规模表达

HEK293T细胞可悬浮培养用于大规模表达，表达蛋白的结构最接近其在人体内的构象。

快速生长和高密度培养

HEK293T细胞在培养体系中能够快速增长，支持高密度培养。

对外界微环境敏感

与神经元细胞一样，HEK293T细胞对外界微环境较为敏感，利用这一特点，可用于药物发现及细胞毒性测试。

293T细胞的应用

HEK293T细胞主要用于基因表达及蛋白生产，此外，它们还常用于慢病毒、逆转录病毒及腺病毒的包装。这些细胞通过转入SV40T-antigen基因形成的高转衍生株，使得包含SV40ori的质粒能够在该细胞系中显著扩增，从而促进表达载体的扩增和蛋白的表达。HEK293T细胞除了可用于各类基因表达及蛋白生产外，还具有以下特点和应用：

此外，HEK293T细胞系还广泛应用于生产蛋白、疫苗、抗癌试剂及重组腺病毒包被等，是生物制药和生物医学研究中的重要工具。

基因转移和表达研究

由于293T细胞具有高转染效率的特点，它们常被用于基因转移和表达研究。科学家可以通过转染技术将感兴趣的基因转入293T细胞中，然后通过各种分析方法来研究这些基因的功能和相互作用。

慢病毒包装

293T细胞也是慢病毒包装的理想工具。慢病毒是一种病毒载体系统，可以感染细胞并实现稳定导入基因或siRNA的目的。293T细胞因其高转染效率而被广泛用于慢病毒的生产和包装。

总结

综上所述，293T细胞作为一种高度转化的肾上皮细胞系，因其高转染效率、快速生长和易于操作等特点，在基因转移和表达研究、特别是慢病毒包装方面发挥着重要作用。