一步法快速支原体检测试剂盒(等温扩增法)

产品简介

本产品利用等温扩增技术与可视化颜色变化能够快速检测细胞培养液中常见的8种支原体，无需DNA提取，直 接在反应液中加1 µL细胞培养上清，65℃反应 30min，阳性样本反应液颜色由黄色变为红色，整个过程无需PCR仪，无需开盖电泳，可有效避免气溶胶造成的交叉污染。与传统的PCR法相比，本产品操作简便、灵敏度非常高，可耐受培养基中的多种 PCR抑制剂，因此不会出现假阴性现象，检测结果与qPCR具有极高的一致性。

产品信息

试剂盒组成

包含显色剂。

实验前准备

65C水浴锅或金属浴；

一步法快速支原体检测试剂盒操作步骤

待测样本准备

1) 贴壁细胞：直接吸取上清。建议在细胞接种或换液 3 天以上，汇合度达到 90%左右时取样，此时上清中支原体含量较高，容易检出。

2) 悬浮细胞：1000 rpm 离心 5 min 后，取上清。建议在细胞接种或换液 3 天以上时取样，此时细胞培养液中支原体含量较高，容易检出。

2.反应体系

a：Mycored Buffer 解冻后颠倒混匀使用。

b：根据样本数量；将以上反应体系配好之后,分装到反应管中,加入20μL 的 Paraffin Oil,再进行下一步。

3.加样

1)阴性对照：第一个反应管中不加任何样本作为阴性对照；

2)阳性对照：向最后一个反应管中加入1μL Positive Control作为阳性对照；

3)待测样本：向其余反应管中加入1μL细胞培养上清。

请将枪头伸向Paraffin Oil 液面下加样。

4.反应条件

将反应管转移至提前预热的65℃水浴锅或金属浴中，孵育 30min。

结果判定

反应结束后立即将反应管取出，待恢复至室温后,如果反应液仍为黄色,判断结果为阴性;如果反应液变为红色，判断结果则为阳性。反应管不可开盖,否则很容易导致气溶胶污染。

注意事项

1.反应结束后请勿打开反应管。

2.建议在配制反应液过程中使用带滤芯的吸头,并将弃掉的吸头和反应管放入自封袋中,及时处理。

3.请经常使用核酸清除剂(推荐G3020)擦拭实验台和移液器。