D-Luciferin potassium salt (D-荧光素钾盐)

产品简介

D-荧光素(D-Luciferin) 是荧光素酶(Luciferase) 的常用底物，普遍应用于整个生物技术领域， 特别是体内活体成像技术。其作用机制是在 ATP 和荧光素酶的作用下， 荧光素(底物)能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图) 。将携带荧光素脚编码基因( Luc ) 的质粒转染入细胞后，导入研究动物如大、小鼠体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术( BL )来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用 ATP 对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

D-荧光素也常用于体外研究， 包括荧光素酶和 ATP 水平分析; 报告基因分析; 高通量测序和各种污染检测。目前有三种产品形式：D-荧光素(游离酸)，D-荧光素盐(钠盐和钾盐)。主要差别在于溶解特性：前者的水溶性以及缓冲体系的溶解性都较弱，除非溶于弱碱如低浓度 NaOH 和 KOH 溶液。可溶于甲醇和 DMSO; 后者能够易溶于水或缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。

产品信息

D-荧光素钾盐使用说明

1.体外生物发光检测

(1).用无菌蒸馏水溶解 D-荧光素钾盐，配制成 30mg/mL 的储存液(100-200×)，混匀。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。

(2).用预热好的组织培养基将储存液稀释至 0.15-0.3mg/mL 的工作液浓度。

(3).去除细胞培养基。

(4).待图像分析前， 向细胞内添加荧光素工作液， 37℃孵育 5-10min， 然后进行图像分析。

2.活体成像分析

(1).用无菌的 D PBS(w/oMg、Ca2+) 配制 15mg/mL 的荧光素的储存液， 混匀。

(2).用 0.2um 滤膜过滤除菌。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。

(3).腹腔注射(i.p.)，按照 150mg/kg 的荧光素/体重浓度进行注射。

(4).注射入体内 10-15min(待光信号达到最强稳定平台期) 后进行成像分析。

注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

D-荧光素钾盐注意事项

1.本品(firefly luciferin) 和甲虫荧光素(beetle luciferin) 仅仅是不同公司在命名上的差异， 都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazo line-4-carboxylic acid。

2.注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。

3.如果要进行 ATP 的检测，尽量避免外源 ATP 的污染，如操作时戴手套并使用 ATP-free 的实验耗材，在进行荧光素的溶解时应使用 ATP-free 无菌水。

4.本品要进行避光操作和保存。储存液过滤除菌后可分装于-20℃或-80℃冻存。如果有条件，可对储存液充入氮气或氩气(防止氧化)，稳定性和保存时间长达 1 年。

5.在进行 D-荧光素钾盐的溶解时，应使用无钙镁离子的 DPBS，因钙镁离子可能会抑制荧光素酶的活性，此外镁离子可能会对荧光素的氧化造成影响，从而影响检测。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.本产品仅作科研用途。