D-Luciferin potassium salt (D-荧光素钾盐)

产品简介

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍应用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，D-荧光素能够被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将荧光素酶基因整合到预期观察的细胞染色体上,细胞便可持续稳定的表达荧光素酶。用标记好的细胞接种实验动物,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,可实时监测疾病的发展、药物的疗效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。目前有三种产品形式:D-荧光素(游离酸),D-荧光素盐(钠盐和钾盐)。主要差别在于溶解特性:前者的水溶性以及缓冲体系的溶解性都较弱,除非溶于弱碱如低浓度NaOH和KOH溶液。可溶于甲醇和DMSO;后者能够易溶于水或缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品，在绝大多数的应用.上都没有实质性的差别。

产品信息

使用说明

1.体外生物发光检测

(1).用PBS溶解D-荧光素钾盐，配制成30mg/mL的储存液(100-200×)，混匀。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。

(2).用PBS将储存液稀释至0.15-0.3mg/mL的工作液浓度。

(3).去除培养细胞的原细胞培养基。

(4). 在进行图像分析前，取细胞密度为1×106个/mL的细胞悬液(无需进行裂解处理)置于离心管中，加入100μL的D-荧光素钾盐溶液，置于37℃的孵育箱中孵育5至10分钟。随后，将处理后的细胞悬液加入96孔板中，按标准细胞密度进行铺板，以进行后续的图像分析。

2.活体成像分析

(1).用无菌的D PBS(无Mg2+、Ca2+) 配制15mg/mL的荧光素的储存液， 混匀。

(2).用0.2um滤膜过滤除菌。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。

(3).腹腔注射(i.p.)，按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射。

(4).注射入体内10-15min(待光信号达到最强稳定平台期) 后进行成像分析。

注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

注意事项

1.本产品对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

2.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。