红细胞裂解液

产品描述

红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Solution)是利用细胞内外盐离子浓度差的原理，温和的裂解无核红细胞。本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解，例如鸟或禽类的红细胞。本裂解液经过无菌处理，处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。

产品信息

表1. 试剂盒组成信息

使用说明

细胞悬液样本：

1.第一次裂解，加入5-8倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，室温裂解5min(仅做参考)。

2. 300g离心10min，弃红色上清。

3.如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤1、2步进行短时多次裂解。但后续每次加入的红细胞裂解液为上一次的一半，但最少不能低于2ml.裂解液减少到只剩余2ml时，

每次裂解结束，需先加入10ml PBS进行终止，并300g离心10min，弃红色上清。直至红

细胞裂解完全，裂解结束。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

4. 洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，300g离心5min，弃上清。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。

5. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

血液样本：

1. 取新鲜抗凝血，400-500g离心5min，离心弃血浆。

2. 第一次裂解，加入5-8倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解5min(仅做参考)。

3.300g离心10min，弃红色上清，留沉淀。

4. 如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2、3步进行短时多次裂解。但后续每次加入的红细胞裂解液为上一次的一半，但最少不能低于2ml。裂解液减少到只剩余2ml时，每次裂解结束，需先加入10mlPBS进行终止，并300g离心10min，弃红色上清。直至红细胞裂解完全，裂解结束。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

5.洗涤1-2次:加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，300g离心5min，弃上清。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。

6.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

新鲜组织样本(以小鼠脾脏样本为例)：

1. 新鲜组织样本磨碎后，过滤离心去上清。

2. 沉淀加入3ml红细胞裂解液，室温裂解2min(仅做参考)。

3. 300g离心5min，弃红色上清，留沉淀。

4. 如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2、3步进行短时多次裂解。但后续每次加入的红细胞裂解液为上一次的一半，但最少不能低于2ml。裂解液减少到只剩余2ml时，每次裂解结束，需先加入10mlPBS进行终止，并300g离心10min，弃红色上清。直至红细胞裂解完全，裂解结束。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

5.洗涤1-2次:加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，300g离心5min，弃上清。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。

6.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

注意事项

本红细胞裂解液为无菌产品，分离细胞用于细胞培养时请注意无菌操作。对于微量或少量的血液样品，可以在第一步中不进行离心弃上清的操作，直接在第二步中加入5-10倍血液体积的红细胞裂解液，进行裂解。对于鼠的血液，裂解时间稍短，对于人的外周血，宜延长裂解时间，具体裂解时间需客户自行摸索，以达到最佳裂解效果。裂解过程中宜适当摇动以促进红细胞裂解。为了您的安全与健康，请穿戴实验服并戴一次性手套操作。