hPSC（H1）来源肝实质细胞

背景介绍

hPSC-肝实质细胞是从人类多能干细胞(hPSC)分化得来，该细胞部分具有双 核结构，能表达肝实质细胞的特异性Marker(如 ALB 、CYP3A4 等)

产品信息

培养操作(以六孔板 1 孔为例)

1)复苏细胞：

将含有 1 mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 5 mL 肝 实质细胞维持培养基(含 10 μM IMC-014-Y)混合均匀。在 1000 rpm 条件下离心 3 min，弃去 上清液，加 1-2mL 肝实质细胞维持培养基(含 10μM IMC-014-Y)后混匀。然后将所有细胞 悬液加入含适量肝实质细胞维持培养基(含 10μM IMC-014-Y)的基质胶包被的六孔板(1孔) 或 35mm 皿中培养过夜。24h 后，换成不含IMC-014-Y 的肝实质细胞维持培养基，视培养基颜 色或隔2-3 天换液。

2)细胞铺板(当有实验需求时可按实验所需密度铺板)：

a 、弃去培养基，每孔加入 1mL 胰蛋白酶消化液(货号 IMC-504)，置于 37℃培养箱消化 5-10 min。

b 、5-10 min 后每孔加入等量肝实质细胞维持培养基中止消化，轻轻吹打细胞，使细胞解 离成单细胞。

c 、将细胞悬液收集到 15 mL 离心管中，室温下 300 g 离心 5 min。

d 、仔细抽吸上清液，不干扰细胞，用 1mL 恢复室温的肝实质细胞维持培养基重悬细胞， 轻轻地上下移液以确保细胞溶液均匀。

e 、使用肝实质细胞维持培养基稀释细胞，将细胞按实验所需密度接种到基质胶或 laminin521包被的六孔板或 35mm 皿中培养。视培养基颜色或每隔2-3 天换液。

培养注意事项

1. 若按培养的细胞发货，收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等 现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、所需细胞因子等， 确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变 化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 客户可购买逸漠生物肝实质细胞维持培养基(含肝实质细胞维持基础培养基，货号 IMI-PE01M;肝实质细胞维持培养基补充剂，货号 IMI-PE01M)。

5. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交 流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具 体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

6.该细胞仅供科研使用。

备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条 件新配制的完全培养基来培养细胞。