hPSC来源中脑多巴胺神经元细胞imDA-H1

背景介绍

hPSC来源多巴胺神经元是从人类多能干细胞(hPSC)分化得来，该细胞是分化早期的多巴胺神经元，在维持培养基中培养时具有继续向成熟多巴胺神经元分化的能力。分化获得的成熟多巴胺神经元能表达特异性标志物(如TH, DAT，GIRK2等)。

产品信息

培养操作

1)复苏细胞：

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL mDA维持培养基(含10μM Y-27632)混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL mDA维持培养基(含10μM Y-27632)后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量mDA维持培养基(含10μM Y-27632)的基质胶或laminin或神经元培养包被液(货号：IMI-MA01MB)包被的六孔板(1孔)或35mm皿中培养过夜。48h后，换成不含Y-27632的mDA维持培养基(若期间培养基变黄，及时换液)，视培养基颜色或隔2天换液。

2)细胞传代：

(当有实验需求时可按培养器皿底面积1:1比例接种传代)

a、弃去培养基，加入1-2 mL Accutase(含10μM Y-27632)，置于37℃培养箱消化5min。

b、5 min后每孔加入等量 mDA维持培养基(含10μM Y-27632)，轻轻吹打细胞，使细胞解离成单细胞。

c、将细胞悬液收集到15 mL离心管中，室温下300 g离心5 min。

d、仔细抽吸上清液，不干扰细胞，用1mL恢复室温的mDA维持培养基重悬细胞(含10μM Y-27632)，轻轻地上下移液以确保细胞溶液均匀。

e、使用mDA维持培养基(含10μM Y-27632)稀释细胞，将细胞以实验所需细胞量接种到基质胶或laminin或神经元培养包被液(货号：IMI-MA01MB)包被的培养板中培养过夜。48h后，换成不含Y-27632的mDA维持培养基，视培养基颜色或隔2天换液。

培养注意事项(若以培养瓶形式发货)

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置2-4h。

4. 客户可购买逸漠生物mDA维持培养基(含mDA维持基础培养基，货号IMI-MA01M1 ;mDA维持培养基补充剂，货号IMI-MA01MA，神经元培养包被液，货号IMI-MA01MB)。

5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

6.该细胞仅供科研使用。

备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。