hPSC来源运动神经元祖细胞iMNP-H1

产品描述

hPSC-运动神经元祖细胞是从人类多能干细胞(hPSC)分化得来，该细胞为 运动神经元的前体细胞，具有继续向成熟运动神经元(mMN)分化的能力。分化获得的成熟 运动神经元(mMN)能表达运动神经元的特异性 Marker(如 CHAT, MAP2 等)

产品信息

培养操作(以六孔板 1 孔为例)

1)复苏细胞：

将含有 1 mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL

MNP 维持培养基(含 10 μM IMC-014-Y)混合均匀。在 1000 rpm 条件下离心 3 min，弃去上 清液，加 1-2 mL MNP 维持培养基(含 10 μM IMC-014-Y)后混匀。然后将所有细胞悬液加 入含适量 MNP 维持培养基(含 10 μM IMC-014-Y)的基质胶包被的六孔板(1 孔)或 35mm 皿中培养过夜。24h 后，换成不含IMC-014-Y 的 MNP 维持培养基，视培养基颜色或隔 2 天 换液。

2)细胞传代(可按培养器皿底面积 1:6 比例接种传代)：

a、弃去培养基，每孔加入 1mL Accutase(含 10 μM IMC-014-Y)，置于 37℃培养箱消 化 4-5min。

b、4-5 min 后每孔加入等量 MNP 维持培养基(含 10 μM IMC-014-Y)，轻轻吹打细 胞，使细胞解离成单细胞。

c、将细胞悬液收集到 15 mL 离心管中，室温下 300 g 离心 5 min。

d、仔细抽吸上清液，不干扰细胞，用 1mL 恢复室温的 MNP 维持培养基重悬细胞(含 10 μM IMC-014-Y)，轻轻地上下移液以确保细胞溶液均匀。

e、使用 MNP 维持培养基(含 10 μM IMC-014-Y)稀释细胞，将细胞以 1:6 比例接种到 基质胶包被的六孔板或 35mm 皿中培养过夜(按底面积算， 1 个 T25 相当于六孔板 2.5 个

孔，六孔板 1 孔可传 12 孔板的2 孔，24 孔板的 4 孔，96 孔板的6 孔)。24h 后，换成不含 IMC-014-Y 的 MNP 维持培养基，视培养基颜色或隔 2 天换液。

培养注意事项

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象， 若有上述现象发生 请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、所需细胞因子等， 确 保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变 化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 客户可购买逸漠生物 MNP 维持培养基(含 MNP 维持基础培养基，货号 IMI-MP01M1 ; MNP 维持培养基补充剂 A(200×),货号 IMI-MP01MA ;MNP 维持培养基补充剂 B(50 ×),货号 IMI-MP01MB)。

5. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交 流。由于运输的原因， 个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具 体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

6.该细胞仅供科研使用。

备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件 新配制的完全培养基来培养细胞。