背景简介
hPSC-视网膜色素上皮细胞是从人类多能干细胞(hPSC)分化得来，能表达视网膜色素上皮细胞的特异性Marker(如MITF、PAX6、BEST1等)。
| 一、细胞基本属性 |
| 细胞名称 | hPSC来源视网膜色素上皮细胞 iRPE(iPSC) |
| 种属来源 | 人 |
| 组织来源 | 人多能干细胞iPSC |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 细胞形态 | 细胞贴壁后伸展为扁平形态，胞体薄而宽，核区略隆起。成熟状态的RPE细胞呈现规则的铺路石样排列，细胞边界清晰，相邻细胞紧密连接，形成类似蜂巢的结构。 |
| 培养基 | RPE维持培养基（含RPE维持基础培养基，货号IMI-RE01M ；RPE维持培养基补充剂，货号IMI-RE01M） |
| 细胞规格 | 2×106 个细胞 |
| 支原体检测 | 无 |
| 培养条件 | 气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃ |
| 冻存条件 | 无血清细胞冻存液（货号IMC-701），液氮储存 |
| 特别说明 | 以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主 |
| 二、细胞培养操作 |
| 复苏细胞 | 将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加5 mL RPE维持培养基（含10μM Y-27632）混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加2 mL RPE维持培养基（含10μM Y-27632）后吹匀。加入基质胶包被的六孔板（1孔）或35mm皿中培养过夜。24h后，换成不含Y-27632的RPE维持培养基，每隔2-3天换液。 |
细胞传代 | a、弃去培养基，加入1-2 mL TryplE，置于37℃培养箱消化10-15min。 b、10-15min后每孔加入等量 RPE维持培养基，轻轻吹打细胞，使细胞解离成单细胞。 c、将细胞悬液收集到15 mL离心管中，室温下300 g离心3min。 d、仔细抽吸上清液，不干扰细胞，用1mL恢复室温的RPE维持培养基重悬细胞，轻轻地上下移液以确保细胞溶液均匀。 e、使用RPE维持培养基稀释细胞，将细胞以1:4-1：5比例接种到基质胶包被的六孔板（1孔）或35mm皿中培养，每隔2-3天换液，每3周传一次代。 |
| 培养注意事项 | 1. 该细胞最多可传3代，若传代培养过程中出现异常形态变化说明细胞可能失去了RPE特性，可丢弃。 2. 传代初期，细胞不会出现明显的RPE形态，直至细胞密度达到100%，才会逐渐呈现铺路石样排列，形成类似蜂巢的结构。 3. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。 4. 客户可购买RPE维持培养基（含RPE维持基础培养基，货号IMI-RE01M ；RPE维持培养基补充剂，货号IMI-RE01M）。 5. 该细胞仅供科研使用。 |
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