hPSC(hiPSC)来源胰腺祖细胞 iPP(hiPSC)

产品概述

hPSC-胰腺祖细胞是从人类多能干细胞(hPSC)分化得来，能表达胰腺祖细胞的特异性Marker(如NKX6.1、PDX1等)。

培养操作

一、胰腺祖细胞复苏

(1) 将含有 1 mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 10mL DMEM 培 养基(含 10 μM Y-27632)混合均匀。

(2) 300g 离心 3min，弃去上清，加 1 mL 胰腺祖细胞维持培养基(含 10 μM Y-27632) 重悬，按 3.2×105 个细胞/cm2 密度接种，培养 24h。

(3) 24h 后，换成不含Y-27632 的胰腺祖细胞维持培养基进行维持培养，每天换液。

二、细胞传代

(1) PP 生长 4-7 天后(此时密度应至少 100%)，从培养物中抽吸培养基，在 6 孔板中 每孔用2 mL 1×室温 PBS(不含 Ca2+/Mg2+)清洗培养物，吸去 PBS 。 每孔加入 1mL 的 室温 Tryple，将培养物置于 37℃ 5%CO2 细胞培养箱中孵育 3-5 min。

(2) 3-5min 后每孔加入 1mL DMEM 中止消化，轻轻吹打细胞，使细胞脱离孔底。

(3) 将细胞悬液收集到 15 mL 离心管中，室温下 300 g 离心 3 min。

(4) 仔细抽吸上清液，不干扰细胞，加 1 mL 胰腺祖细胞维持培养基(含10μM Y-27632) 重悬，按 2. 1×105 个细胞/cm2 进行接种，培养 24h。

(5) 24h 后，换成不含Y-27632 的胰腺祖细胞维持培养基继续维持培养，每天换液。