hPSC(iPSC)来源星形胶质细胞 iAST(iPSC)

产品概述

hPSC-星形胶质细胞是从人类多能干细胞(hPSC)分化得来，能表达星形胶质细胞的特异性Marker(如GFAP、S100β等)。

培养操作

1)复苏细胞：

将含有 1 mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 5 mL AST 维持基础培养基(含 10 μM Y-27632)混合均匀。在 300 g 条件下离心 3 min ，弃去上清液， 加 2mL AST 维持培养基(含 10μM Y-27632)后吹匀。加入基质胶包被的六孔板(1 孔)或 35mm 皿中培养过夜。24 h 后，换成不含Y-27632 的 AST 维持培养基，每隔 1 天换液。

2)细胞传代：

a、弃去培养基，2mL 1x 室温 PBS(不含 Ca2+/Mg2+)清洗细胞，加入 1 mL 室温的 Accutase， 置于 37℃培养箱消化 3-4 min。

b 、3-4 min 后轻敲培养板一侧，检查细胞是否容易分离(不容易则再孵育 1 min)。

c 、每孔加入等量 AST 维持培养基，轻轻吹打细胞，使细胞解离成单细胞。

d 、将细胞悬液收集到 15 mL 离心管中，室温下 300g 离心 3 min。

e 、仔细抽吸上清液，不干扰细胞，用 1 mL 恢复室温的 AST 维持培养基重悬细胞(含 10 μM Y-27632)，轻轻地上下移液以确保细胞溶液均匀。

f、使用AST 维持培养基稀释细胞，将细胞以 1:6 比例接种到基质胶包被的六孔板(1孔) 或 35mm 皿中培养，每隔 1 天换液，每 4-7 天传一次代。

培养注意事项

1. 该细胞最多可传 3 代，若传代培养过程中出现异常形态变化说明细胞可能失去了AST 特性， 可丢弃。

2. 当星形胶质细胞复苏后，在 6 孔板中进行至少一周的稳定培养再进行后续实验，在此期间 可每 3-4 天传代细胞 1-2 次，提高细胞存活率和纯度。

3. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、所需细胞因子等， 确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

4. 客户可购买逸漠生物 AST 维持培养基(含 AST 维持基础培养基，货号 IMI-AT01M ;AST 维持培养基补充剂，货号 IMI-AT01M)。

5. 该细胞仅供科研使用。