hPSC诱导肺类器官成熟培养基

产品描述

本产品为hPSC诱导肺类器官成熟培养基，可以维持hPSC诱导分化肺类器官试剂盒(IMV-L001)诱导分化获得的肺类器官的长期生长、传代扩增。

实验仪器、材料

仪器：生物安全柜、细胞培养箱、水平式离心机、倒置显微镜、低温冰箱

材料：细胞培养板(规格为：6孔、12孔、24孔)、离心管(规格为15 mL 和 50 mL)、移液器(规格为 10 μL、100 μL、1000 μL)、无菌吸头(规格为 10 μL、200 μL 和 1000 μL)、移液管(规格为10mL、50mL)

产品规格

实验内容与方法

肺类器官换液

吸去孔中培养基，每孔加入700μL 恢复室温的肺类器官成熟培养基，并每隔一天更换培养基。

肺类器官传代

(1)取出冷冻的基质胶置于4℃解冻，并提前将枪头放置在-20℃预冷1h;

(2)吸除培养基，加入1mL预冷的Tryple(含1%BSA)，静置1min;

(3)使用1mL移液枪，吹打孔中混合物40-50次，注意：不要产生气泡;

(4)每孔加入1mL预冷的PBS，将混合物转移到15mL离心管中;

(5)用1mL预冷的PBS清洗培养板，并将该清洗液加入上一步的离心管中，并补充预冷的PBS，使离心管中的终体积为12mL;300g离心5min，去上清;

(6)用预冷枪头按每孔30μL的量在离心管中加入适量的基质胶，吹打5-8次，均匀混合单细胞-基质胶，注意吹打过程中避免产生气泡;

(7)将提前放在培养箱中的24孔板取出，在孔中心位置加入30μL胶滴，缓慢打入混合液时，逐渐向上移动枪头，使细胞均匀分布在胶中;

(8)将培养板放在培养箱中，20-30min，使胶滴凝固;

(9)小心沿孔壁加入700μL恢复室温的肺类器官成熟培养基，每隔1天换液一次(可周一、周三、周五换液，周五可添加至800μL，周六、周日不换液)，注意：不要碰到胶滴，将孔板放到培养箱中，继续培养。