5(6)-CFDA（5(6)-羧基二乙酸荧光素）

产品描述

5(6)-CFDA(5-(6)-Carboxyfluorescein Diacetate N-Succinimidyl Ester)是一种细胞渗透性、胺反应型、广泛应用于细胞生物学研究的绿色荧光探针，主要用于细胞增殖示踪和迁移实验。(λex:492nm; λem:517nm)。

产品信息

表1.组成信息

产品优势

1、细胞渗透和活化

5(6)-CFDA本身无荧光，进入活细胞后被胞内酯酶水解为羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(CFSE)，发出绿色荧光(激发波长492nm，发射波长517nm)

2、荧光分配机制

在细胞分裂时，CFSE标记的荧光分子均分至子代细胞，荧光强度逐代减半，通过流式细胞仪可检测分裂次数(如未分裂、1次分裂、2次分裂等)。

使用说明

一、试剂配制

1、制备储存液(1000×)

用DMSO配制10 mM的5(6)-CFDA。如用0.2mL DMSO溶解1mg 5(6)-CFDA。

注：5(6)-CFDA储存液建议分装后于-20℃或-80℃避光保存。

2、配制工作液

用预热好的无血清细胞培养基或PBS稀释储存液，配制成1-10μM的5(6)-CFDA工作液。

注：请根据实际情况调整5(6)-CFDA工作液浓度，且现用现配。

二、细胞染色

1、细胞制备：

悬浮细胞：离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次5分钟。

贴壁细胞：弃去培养基，加入胰蛋白酶消化细胞。离心弃去上清后，加入PBS洗涤两次，每次 5分钟。

2、加入1mL 5(6)-CFDA工作液，室温孵育15分钟。

3、400 g，4℃离心3-4分钟，弃去上清。

4、加入PBS洗涤细胞两次，每次5分钟。

5、用1 mL无血清培养基或PBS重悬细胞后，在荧光显微镜或流式细胞仪下检测。

注意事项

1、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3、荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

4、染色前彻底去除血清、死细胞及碎片，避免非特异性结合。