BCECF AM（pH荧光探针，5mM）

产品简介

BCECF(2',7'-bis-(2-carboxyethyl)-5-(and-6)-carboxyfluorescein )全称2',7'-二-(2-羧乙基)-5(6)-羧基荧光素，被广泛地用于细胞内pH的测定。加入的两个羧基使得它能更好的被固定在细胞内。BCECF具有很好的水溶性，是因为它在中性pH时带有4-5个负电荷。其AM形式的乙酰酯衍生物具有膜通透性，可以被动地穿过细胞膜。且BCECF AM本身不发荧光，通过胞内酯酶作用后成为BCECF发出荧光信号，可以作为细胞活力地判断依据之一。BCECF AM不仅被广泛用于哺乳动物细胞的研究，也有报道用于动物组织、植物细胞、细菌和酵母等的细胞内pH水平检测。在有细胞内pH变化的细胞毒性、细胞凋亡、细胞粘附、药物抵抗、细胞趋化等过程中BCECF AM被广泛应用。BCECF在适当的pH值条件下可以被激发形成绿色荧光。

本BCECF AM(pH荧光探针)是配制于无水DMSO(anhydrous DMSO)中的储存液，浓度为5mM。

产品信息

表1.组成信息

使用说明

以人中性粒细胞为例

常用的BCECF, AM工作液浓度为1～10 μM，使用去离子水进行稀释，现用现配，不建议将工作液进行保存。

(1)制备细胞悬液，细胞密度约为1×106cells/ml。

注意: 对于贴壁细胞，也请尽量保证细胞浓度约为106cells/mL，并使用相同的染色条件。

(2)将5mM的BCECF AM溶液加入到细胞悬液中，使其终浓度为5μM。

(3)37℃孵育30分钟。

(4)用HEPES缓冲液清洗细胞2-3次。

(5)使用荧光显微镜或带有图像分析系统的激光共聚显微镜检测细胞的荧光强度。

注意：标记的条件因细胞种类而异，在每次实验前，请先确定最佳条件，以上方法仅供参考。

注意事项

1、由于BCECF,AM在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部溶解后使用。

2、BCECF,AM工作液必须现配现用。

3、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5、荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。