Hoechst33258（活细胞染色液），即用型

产品简介

Hoechst 33258(赫斯特荧光染色液)是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，它在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光，对细胞的毒性较低。Hoechst 33258常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测，也可以用于普通的细胞核染色，或常规DNA染色。Hoechst 33258-DNA 的激发和发射波长分别为350 nm和460nm。

产品信息

表1.组成信息

使用说明

1、固定的细胞或组织染色：

(1)对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst33258染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33258染色。

(2)对于贴壁细胞或组织切片：加入适量Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。

(3)吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。

(4)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm，发射波长460 nm。

2、活细胞或组织染色：

(1)细胞培养物中加入适量Hoechst 33258染色液，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1mL染色液，对于96孔板一个孔需加入100μL染色液。

(2)在37℃培养细胞10～20分钟。

(3)用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

(4)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm，发射波长460 nm。

注意事项

1、Hoechst 33258对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

2、荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

3、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5、本产品仅作科研用途。