脑胶质瘤类器官培养试剂盒

产品描述

脑胶质瘤类器官试剂盒是一款适用于原代人源脑胶质瘤类器官构建和稳定培养的试剂盒。该试剂盒可实现人源脑胶质瘤类器官的构建、扩增和冻存，并稳定保留原始肿瘤组织的基因组学与病理学特征，因此在医学研究中具有巨大的应用前景。

产品信息

表1. 试剂盒组成信息

表2. 其他自备材料和试剂

脑胶质瘤类器官完全培养基使用说明

请在生物安全柜中无菌操作配制脑胶质瘤类器官完全培养基。以下以配制10 mL完全培养基为例，如需配制其他体积，可进行相应调整用量。

1. 冰上解冻融化脑胶质瘤类器官培养基添加剂B(25 x)和脑胶质瘤类器官培养基添加剂C(250 x)

2.在无菌条件下，将400 μL脑胶质瘤瘤类器官培养基添加剂B(25 x)和40 μL脑胶质瘤类器官培养基添加剂C(250 x)加入9.56 mL脑胶质瘤类器官基础培养基中，充分混合。

注意：

分装后的类器官培养基需储存于-20℃，有效期两年，注意避免反复冻融;

解冻后类器官完全培养基可在 4°C 储存，建议在两周内使用;

类器官培养基中内含有抗生素。

脑胶质瘤类器官的建立与传代培养

原代脑胶质瘤类器官的建立

注意：涉及人体生物样本的研究必须遵循所有相关的机构和政府法规。在收集人体生物样本之前，必须获得样本提供者的知情同意。

1.将收集到的脑胶质瘤肿瘤组织浸泡于装有2-8℃组织保存液的样本保存管中，样本转移运输过程中需全程保持2-8℃，尽量缩短运输时间。

2.转移肿瘤组织至细胞培养皿中，使用无菌手术剪刀或手术刀和镊子尽可能多地去除脂肪、肌肉或坏死组织等。

3.用2-8℃组织清洗液清洗组织3次，洗去组织表面残渣。

4.在细胞培养皿中，使用无菌手术剪刀或手术刀将组织切碎成直径约0.5-1mm的小块，用类器官专用基础培养基清洗去细胞碎片。

注意：脑胶质瘤肿瘤组织脆弱，剪切过程最好干脆利落，避免撕扯组织。

5. 弃去类器官专用基础培养基后，加入红细胞裂解液，37℃摇床裂解红细胞10 min。

6.去除红细胞裂解液，用类器官专用基础培养基清洗脑胶质瘤组织碎片2-3次。

7.加入适量脑胶质瘤类器官完全培养基，转移组织碎片至超低吸附12孔细胞培养板中，每孔建议培养5-10颗。

8. 37℃，5% CO2恒温培养箱，90-120 rpm摇床上培养，隔天更换一次培养基，密切关注类器官生长情况，理想情况下，通常在1-2周内形成圆形的脑胶质瘤类器官，并在培养过程中持续生长。

脑胶质瘤类器官的传代培养

1. 轻轻转移脑胶质瘤类器官至细胞培养皿中，用无菌弹簧剪刀和镊子将成熟的脑胶质瘤类器官剪切成原本类器官大小的1/4-1/2。

2. 转移切割后的脑胶质瘤类器官至超低吸附12孔细胞培养板中，每孔建议5-10颗。

3. 37℃，5% CO2恒温培养箱，90-120 rpm摇床上培养，隔天更换一次培养基。

注意：脑胶质瘤类器官随着传代，类器官形成的时间逐渐延长，数量逐渐减少，每代脑胶质瘤类器官注意做好冻存及保种工作。

注意事项

1. 本产品仅适用于科研用途，使用前请仔细阅读本说明书。

2. 本产品实验操作均为无菌操作，所有消耗品均应灭菌后一次性使用。

3. 使用完本产品后需密封避光保存，以避免试剂污染或失效。