常见结直肠癌细胞株有哪些和结直肠癌常用的动物模型介绍

结直肠癌(Colorectal cancer，CRC)是一种起源于结肠或直肠内的恶性肿瘤。根据国家癌症中心最新统计数据，我国结直肠癌发病率居恶性肿瘤第二位，死亡率居第四位，结直肠癌的治疗方法通常包括手术切除、放疗、化疗和靶向治疗等。结直肠癌(Colorectal cancer，CRC)是一种起源于结肠或直肠内的恶性肿瘤。根据国家癌症中心最新统计数据，我国结直肠癌发病率居恶性肿瘤第二位，死亡率居第四位，结直肠癌的治疗方法通常包括手术切除、放疗、化疗和靶向治疗等。手术切除是最常见的治疗方法。放疗和化疗常常与手术联合应用，以清除残余癌细胞或控制肿瘤的扩散。靶向治疗是一种针对特定癌症细胞的治疗方法，通过抑制细胞生长或破坏其发展的信号传递途径来达到治疗的效果。常见的化疗药物有5-氟尿嘧啶、奥沙利铂、卡培他滨以及靶向治疗药物：如抗EGFR抗体(如西妥昔单抗，Cetuximab)和抗VEGF抗体(如贝伐珠单抗，Bevacizumab)等。

结直肠癌常用的动物模型

肿瘤模型对研究肿瘤生长的生物学过程和抗肿瘤治疗药物的研发非常重要。国内外建立结直肠癌动物模型的报道有很多，大体可以分为以下三种：

化学诱导模型 

诱发型结直肠癌模型多采用化学诱发途径，常用的诱导剂有二甲基肼(dimethylhydrazine,DMH)、氧化偶氮甲烷(azoxymethane,AOM)及致炎剂葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodiuln, DSS)。DMH本身不致癌，但在肝细胞内质网被氧化成甲基氧化偶氮甲醇，随胆汁进入肠腔，导致结直肠癌上皮癌变。AOM是DMH在肝脏的代谢产物，它通过DNA烷化，促进碱基的错误配对，导致肠癌的发生。

转基因小鼠模型

在结直肠癌研究中，转基因小鼠模型可以模拟结直肠癌的发展和机制。以下是一些常见的转基因肠癌小鼠模型

1.APC Min/+ 小鼠模型是最常见的肠癌模型之一。其利用APC基因突变模拟人类肠癌中的APC基因突变。这个突变会影响Wnt信号通路的调控，导致细胞增殖异常，促进肿瘤的发展。APC Min/+ 小鼠会产生多发性肠道腺瘤，最终导致结肠腺癌的产生。这是一种遗传模型，不能模拟所有肠癌的变异情况，但是研究肠道肿瘤发展和药物治疗评价非常有用的小鼠模型。

2.Villin-CreERT2;APC flox/flox 模型是另一种常用于研究肠癌的转基因小鼠模型，它结合了Villin基因驱动的Cre酶表达和APC基因的floxed(flanked by loxP sites)序列，通过给予小鼠诱导剂(如tamoxifen)激活Cre酶，可以在特定时间点诱导APC基因的缺失，引发肠癌。该模型可以模拟肠癌的发展，并研究在特定时间点缺失APC基因对肠道肿瘤的影响。

3.LSL-K-ras G12D模型是一种用于研究肿瘤发展和癌基因K-ras的小鼠模型。K-ras G12D 的过度激活已与多种癌症相关，包括肺癌和结直肠癌。这个模型为了激活K-ras G12D 突变，使用Cre酶来剪切loxP位点，从而激活K-ras基因的表达，促进癌症的产生。该模型可用于研究K-ras G12D 在肿瘤发展中的作用。

移植瘤模型

结直肠癌移植瘤模型主要分为三种：同源肿瘤移植瘤模型(Syngeneic)、人肿瘤细胞株异种移植模型(CDX)、患者来源的肿瘤异种移植模型(PDX)。

同源肿瘤移植瘤模型(Syngeneic)

常见的同源移植结直肠癌模型是使用结直肠癌细胞系在同种动物体内进行移植的模型。以下是一些常见的同源结直肠癌模型：

1.CT26 细胞系模型是一种常用于癌症研究的小鼠同源移植结直肠癌模型。CT26细胞系最早由Balb/c小鼠的结肠腺癌组织中分离出来，将其接种于Balb/c小鼠构建而成的移植瘤模型被广泛用于肿瘤生物学、药物治疗以及免疫治疗研究等领域。

2.MC38 细胞系模型是一种用MC38细胞系在小鼠体内进行同源小鼠移植结肠癌模型。MC38细胞最早是由C57BL/6小鼠的结肠腺癌组织中分离获得的，将其接种于C57BL/6小鼠构建而成的移植瘤模型常用于研究肿瘤生物学和肿瘤的免疫治疗等。

3.CMT93 细胞系模型是用 CMT93 细胞系的同源小鼠移植结肠癌模型。CMT93 细胞系是从Balb/c 小鼠的结肠腺癌组织中分离获得的细胞系，将其接种于Balb/c小鼠构建而成的移植瘤模型被广泛用于实验室研究，模拟小鼠结肠腺癌的发展等。

CDX模型(Cell Derived Xenograft)

CDX模型是指将人源肿瘤细胞株接种于免疫缺陷小鼠构建的肿瘤移植模型。接种部位主要是皮下接种和原位接种。皮下接种荷瘤小鼠模型耗时短、费用低、操作简单，但很少出现转移。原位接种荷瘤小鼠模型肿瘤生长微环境与现实更相似，但操作更复杂且易出现转移。常见的结直肠癌细胞株CDX模型有HCT-116、SW620、SW480、Caco-2、HT-29、 COLO 205、 LS 180等。

PDX模型(Patient Derived Xenografts)

PDX模型是将患者来源的癌症组织接种于免疫缺陷小鼠体内构成的模型。该模型保留了原发肿瘤的细胞和组织病理学结构，基因组和基因表达谱也很大程度被保留，对临床疗效的可预测性达到80%以上，是目前公认的准确性最高的肿瘤学研究模型。但由于PDX模型构建成本高，患者的癌组织或细胞不易获得，成瘤时间长，成瘤率低等原因，因此PDX模型特别珍贵。南昌乐悠生物科技有限公司已成功构建了47例肠癌PDX，为肿瘤基础研究及抗癌药物临床前药效评价提供了有效工具。

结直肠癌(colorectal cancer，CRC)是胃肠道中常见的消化道恶性肿瘤，其发病率和病死率在消化系统恶性肿瘤中仅次于胃癌、食管癌和原发性肝癌，发病原因尚未明确。因此，结直肠癌的发病机制、进展及药物治疗研究成为了医学研究的热点，而作为研究的基础材料，结直肠癌细胞系的选择十分重要，我们常用的结直肠癌细胞系有哪些呢

结直肠癌常用细胞株(Cell lines )

HCT-116细胞株

来源于一名52岁男性患者结肠腺癌组织;属于中等分化的细胞株;细胞通常呈现多角形的形态;基因谱表达CEA+，keratin+、TGF β 1+和TGF β 2 +; ras原癌突变基因。

SW620细胞株

来源于一名51岁男性患者Dukes’C 型结肠腺癌大肠组织;与SW480是同一病人一年后复发的转移灶，已转移至淋巴结;基因谱表达CEA+、TGF β+、keratin+、myc+、myb+、ras+、fos+、sis+、p53+、abl-、ros-、src-、CSAp-和colon antigen 3-。

SW480细胞株

来源于一名50岁白人男性患者的Duckes’C 型原位结肠腺癌组织;属于相对较低分化的细胞株;细胞呈现典型的上皮细胞形态;基因谱表达CEA+、TGF β+、myc+、myb+、ras+、fos+、sis+、p53+、abl-、ros-、src- 及EGF+。

Caco-2细胞株

来源于一名72岁的白人男性II期中等分化原位结肠腺癌患者的肿瘤组织;基因谱表达keratin+、Retinic acid binding protein 1+、retinol binding protein 2+。

HT-29细胞

1964年由Fogh J用移植培养方法和含15%FBS的F12培养液从原发性肿瘤分离的。该细胞系在裸鼠中成瘤，也能在类固醇处理的地鼠中成瘤，可合成IgA、CEA、TGFβ结合蛋白和黏液素，表达尿激酶受体，但没有检测到血浆酶原活性，不表达CD4，但细胞表面表达半乳糖神经酰胺(HIV的可能替代受体)。该细胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos阳性;p53基因过表达，并且在273位密码子存在G→A突变。

LS174T细胞株

是LS 180结肠腺癌细胞株用胰蛋白酶传代的变异种，比亲本更易传代，能生成大量的癌胚抗原(CEA)。有丰富的微丝和细胞质黏液素液泡;抗原显示colon cancer antigen 3+、p53-、keratin+;癌基因表达c-myc+、N-myc+、H-ras+、N-ras+、Myb+和fos+;可产生IL-10、IL-6和黏蛋白。

COLO 205：1957年由T.U.Sample等从患有结肠癌的70岁男性白人的腹水中分离的。该病人在取腹水样品前已用5-氟尿嘧啶治疗4~6周。角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性;产生CEA、IL10。

LS180细胞株

来源于一名58岁白人女性患者Duckes’B 型结肠腺癌组织;基因谱表达CEA+、IL10+、IL6+、mucin+;colon antigen 3-。

SW1116细胞株

来源于人三期结肠腺癌转，上皮细胞，CSAp阴性，结肠抗原3阴性，角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性，癌基因c-myc，K-ras，H-ras，Myb，sis和fos的表达呈阳性，未检测到癌基因N-myc和N-ras的表达，表达肿瘤特异的核基质蛋白CC-4、CC-5和CC-6。

LOVO细胞株

LoVo建自1971年，从诊断为结肠腺癌的56岁男性白人的一个转移到左锁骨上区的肿瘤结节建系。癌基因c-myc，K-ras，H-ras，N-ras，Myb，sis和fos的表达呈阳性，未检测到N-myc的表达。该细胞在裸鼠中能成瘤，表达肿瘤特异的核基质蛋白蛋白CC-3和CC-4。

HCT-15细胞系

来源于人结直肠腺癌组织，上皮细胞，细胞呈CSAp阴性，角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性，表达癌胚抗原。

LS 180细胞

来源于人结肠组织，上皮细胞，表达抗体：结肠癌抗原3，人类表达HLAA2，B13，B50，表达基因：癌胚抗原(CEA)，白细胞介素10，白细胞介素6，粘蛋白。

NCI-H716细胞

1984年建系，源自一位33岁患有大肠腺癌男性经5-fu治疗后的腹水。可在裸鼠中成瘤。细胞表达多巴脱羧酶，细胞质中有核心致密的内分泌型颗粒。细胞不表达TAG-72，CA19-9和CEA。

COLO 320细胞株

来源于结肠组织，结肠腺癌细胞，该细胞能合成复合胺，肾上腺素。

COLO 320DM细胞株

来源于Dukes氏C型结直肠腺癌组织，结直肠腺癌细胞，CEA、CSAp和结肠抗原3呈阴性，该细胞可产生5-羟色胺、去甲肾上腺素、肾上腺素、ACTH和甲状旁腺素。角蛋白、波形蛋白弱阳性。

CT26.WT细胞株

CT26 是以N-nitroso-N-methylurethane-(NNMU)诱导形成的未分化结肠癌细胞株，它克隆形成的细胞株命名为CT26.WT。用包含编码典型肿瘤相关抗原(TAA) beta-半乳糖苷酶(beta-gal)的lacZ基因的逆转录病毒载体LXSN稳定转染CT26.WT，得到致死的亚克隆CT26.CL25。即使CT26.CL25表达了典型的TAA beta-半乳糖苷酶，在正常小鼠中CT26.CL25 和 CT26.WT的生长率与致死率也保持基本一致。与CT26.CL25 一起可用作测试免疫治疗程序的模型，并用于研究宿主免疫反应。

DLD-1细胞株

1977-1979年间D.L. Dexter和同事分离的两株结直肠腺癌细胞株中的一株。细胞的CSAp阴性(CSAp-)。DLD-1细胞的p53 抗原表达呈阳性(p53抗原产生了一个C→T点突变导致241位的Ser→Phe)。角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。癌基因c-myc, K-ras, H-ras, N-ras, myb, sis 和fos的表达呈阳性。癌基因N-myc的表达未做检测。表达肿瘤特异性核基质蛋白CC-2,CC-3,CC-4,CC-5和CC-6。

RKO细胞系

是一个低分化的结肠癌细胞系。RKO细胞含有野生型P53，但缺乏人甲状腺受体核受体(h-TR beta 1)。RKO细胞的P53蛋白的水平高于RKO-E6细胞。RKO细胞系是RKO-E6和RKO-AS45-1的亲本细胞系。该细胞系在裸鼠中成瘤，且在软琼脂中形成集落。

RKO-E6细胞株

是用脂质体法转染pCMV-E6的结肠癌RKO细胞系。该细胞含有稳定整合受控於巨细胞病毒启动子的人乳头状病毒(HPV)E6癌基因。RKO-E6细胞系和它的母系RKO一起可用于研究p53缺失引起的细胞参数改变p53介导的转录和凋亡等。

RKO-AS45-1细胞

人的cDNA中编码GADD45的开放阅读框克隆到表达载体pCMV.3中，转染结肠癌细胞RKO，建立了RKO-AS45-1细胞株。该细胞含有稳定整合巨细胞病毒(CMV)启动子的表达载体。RKO-AS45-1细胞系和它的母系RKO一起可用于Gadd45对DNA修复、凋亡和药物敏感性研究。

T84细胞

来源于一位72岁的男性结直肠癌患者的肺部转移灶;皮下接种至BALB/c裸鼠并连续传代23次后建立该细胞系。在裸鼠身上传代的过程中，该肿瘤仍保持原始的结直肠癌的组织学特性。T84细胞系生长至饱和状态时形成单层细胞，相邻细胞间有紧密连接和细胞桥粒;该细胞有多种肽类激素、神经递质和维持电解质的定向运输的受体，角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。

常见结直肠癌细胞株有哪些和结直肠癌常用的动物模型介绍，各位科研老师可以根据自己的实验需求选择结直肠癌细胞株。