各种细胞培养瓶、培养皿规格及加液量

细胞培养（cell culture）是指在体外模拟体内环境，使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。在培养细胞时需要用到各种细胞培养耗材，如培养器皿、培养瓶或者多孔培养板来培养细胞，那么不同规格的培养瓶、培养皿、多孔培养板需要加多少培养基及可获细胞量是多少呢？

培养器皿主要有培养瓶、培养皿、多孔培养板这三种。

各种培养瓶、培养皿规格及加液量

细胞培养皿

培养皿是一种用于微生物或细胞培养的实验室器皿，由一个平面圆盘状的底和一个盖组成，一般用玻璃或塑料制成。培养皿材质基本上分为两类，主要为塑料和玻璃的，玻璃的可以用于植物材料、微生物培养和动物细胞的贴壁培养也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的，有一次性的和多次使用的，适合实验室接种、划线、分离细菌的操作，可以用于植物材料的培养。

它最初由在德国生物学家罗伯特·科赫手下工作的细菌学家朱利斯·理查德·佩特里（Julius Richard Petri，1852-1921）于1887年设计，故又称为“佩特里皿”。培养皿质地脆弱、易碎，故在清洗及拿放时应小心谨慎、轻拿轻放。使用完毕的培养皿最好及时清洗干净，存放在安全、固定的位置，防止损坏、摔坏。

常见的玻璃或塑料培养皿，可以用于装取、分离、处理组织，也可以用于细菌毒性、单细胞分离、同位素掺入实验。常见规格为10cm、9cm、6cm、3.5cm等。

细胞培养皿规格及加液量

细胞培养瓶

常见的为玻璃培养瓶，用于培养及繁殖细胞。国产的规格以容量(ml)标识，进口的则以底面积(c㎡)表示。

细胞培养瓶常见的规格：培养面积25cm²（容量50ml）、培养面积75cm²（容量250ml）、培养面积175cm²（容量600ml）、其他还有12.5cm2,25ml；300cm2，850ml等。

细胞培养瓶根据材质可以分为玻璃的和塑料的，底部形状有正方形、长方形、三角形等，根据瓶子容积有5至500ml供选择。另外，表面经过特殊改性处理后，可以让细胞更好的进行贴壁培养，这样根据细胞贴壁面积又可以分为25～175cm2多种。

培养瓶的瓶颈也有多种样式，有直颈、斜颈、角度颈、三角形、矩形。

1）直颈：可以减少培养基因晃动而流到瓶盖里;

2）斜颈：易于倾注，移液管或者细胞刮容易进入瓶体;

3）角度颈：移液管或者细胞刮易于进入瓶身，并且可减少培养基因晃动而流到瓶盖;

4）三角形：移液管或细胞刮更易达到瓶角，宽底增加稳定性;

5）矩形：斜颈的矩形培养瓶瓶底至瓶颈是一个坡度设计，易于倾注，移液管或者细胞刮容易进入瓶体，大部分斜颈瓶都有一个裙边以增加稳定性。直颈和角度颈的矩形培养瓶整个瓶底都是培养面，节省空间并减少培养基因晃动而流到瓶盖。

细胞培养瓶规格及加液量

细胞培养板

细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底（U型和V型）；培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536 孔等。

根据材质的不同的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。

细胞培养板规格及加液量

细胞培养板规格及加液量

24孔板： PLL 100-200μl （200μI）(即可，铺板2h后，吸出PLL （回收）），PBS冲洗2次，晾干备用或不晾干直接用。加培养液量1ml，注意调整细胞密度。

25cm²(5m)→（1:2） 50cm²(10ml)一（1:3）75cm²（15ml）

2cm² （1ml） →1/25—1/40 总细胞悬液

96孔板：PLL20-40μl（40μl）即可，铺板2h后，吸出PLL（回收），PBS冲洗2次，晾干备用或不晾干直按用。加培养液量0.1ml-0.2ml，注意调整细胞密度。

25cm² （5ml）→（1:2） 50cm² （10ml）一（1:3） 75cm² （15ml）

0.32cm² （0.1-0.2ml） →1/150— 1 /250总细胞悬液