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支原体污染检测

发布时间:2023-05-25 17:01:39 细胞资源库平台

支原体污染检测技术服务

技术简介

支原体,直径在0.1-0.3微米,是目前发现的最小的最简单的原核生物,可以轻松地通过滤膜,混入培养系统中,呈高度多形性形态。支原体是实验室中常见的污染细胞的原核生物,能够抑制细胞代谢和生长,改变核酸合成,影响细胞抗原性,导致染色体改变等。因此每一株外来细胞都应进行支原体检测,并且应对培养中的细胞进行定期支原体检测。本实验室采用PCR检测法鉴定支原体污染现象,并用专门的试剂进行清除。

为什么要做支原体污染清除与检测

当实验室建立新的细胞系 ,细胞功能不正常,文章发表,国外期刊杂志要求,细胞冻存之前或实验室细胞常规定期检测时,需要进行支原体污染检测。从2013年开始,《Nature》期刊已正式要求投稿的文章,如涉及细胞培养都要进行支原体检测。以细胞为载体的科学研究,如果不能保证所用的细胞无支原体污染,则实验结果很可能是极端不可靠甚至是完全错误的。

细胞支原体危害

支原体具有变形能力,可透过常见过滤膜(0.22-0.45 μm),因此常规的无菌过滤方法不能将其去除,常用的抗生素也对支原体无效。支原体污染是细胞培养领域的一个世界性问题,世界各国细胞系支原体污染的平均比例为30-60%。支原体可通过细胞之间交叉污染,操作人员的口腔、皮肤造成污染,或者血清等添加物而带入污染。

支原体在光学显微镜下不可见,一般不会引起培养物混浊,因此细胞被支原体污染一般难以察觉。支原体会消耗必须氨基酸,影响细胞生长速率,促进代谢物积累,改变细胞形态,影响 DNA、RNA 以及蛋白质的合成,抑制细胞因子表达,改变被污染细胞的基因表达谱,诱导染色体畸变。

操作流程

细胞支原体检测清除流程

服务对象

实验室的种子细胞,如从ATCC、JCRB、DMSZ等国外权威细胞库采购的珍贵细胞系;

组织珍贵的原代细胞;

需要进行基因编辑的细胞;

各类干细胞(含iPS细胞);

稀有细胞

服务内容

根据客户提供的细胞名称、细胞代次、细胞类型制定细胞的支原体清除方案

根据支原体特异性基因设计引|物,PCR法检测支原体污染程度

提供完整的实验报告 (中英文报告)、原始图片和无支原体污染的细胞

周期:1-2 周

报价:1200元/株

样本运输要求

细胞悬液:用T25培养瓶培养活细胞一瓶,细胞融合度50-60%,充满培养基,标明细胞名称,常温运输。

冻存细胞:收集活细胞沉淀,加入1ml冻存液,用2ml无菌冻存管保存,标明细胞名称,干冰运输

细胞支原体污染检测技术服务委托单

项目案例

细胞支原体清除项目案例

感谢您选择我公司的细胞支原体污染检测与清除服务。如有任何相关的问题,请您联系我们林经理:18046200267,我们即刻为您解答和服务。

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