MEQ氯离子荧光探针

产品简介

MEQ(MQAE)是一个6-甲氧基花青苷衍生物，是细胞内的Cl-荧光指示剂，该染料可以通过受被动扩散所控制的碰撞淬灭来检测离子浓度。目前，检测Cl-所用荧光染料主要是MQAE和SPQ，MQAE相比SPQ来说对于Cl-的浓度有更高的灵敏度和更高的荧光量子比率。

产品信息

表1.组成信息

使用说明

一、探针配制与细胞装载

1、工作液配制

探针需溶解于Krebs-HEPES缓冲液(pH 7.4)，其成分为：20 mM HEPES、128 mM NaCl、2.5 mM KCl、2.7 mM CaCl₂、1 mM MgCl₂、16 mM葡萄糖。推荐工作液浓度为5-10 mM，具体根据实验需求调整。

2、细胞孵育条件

细胞密度：建议为800-1000万细胞/mL。

孵育时间：30-60分钟，需避光操作。

装载体系：通常100 μL探针溶液即可完成标记。

3、洗涤步骤

孵育后需用Krebs-HEPES缓冲液或其他适当溶液洗涤细胞约5次，以去除未结合的探针。

二、荧光检测与校准

检测参数

激发/发射波长：350 nm(激发)、460 nm(发射)。

仪器选择：可使用荧光光谱仪或荧光显微镜记录信号。

荧光强度与氯离子浓度的关系:

(FO/F) – 1 = KSV[Q]

FO 是没有卤化物或其他淬灭离子时的荧光强度,F 是有淬灭剂时的荧光强度,[Q]是淬灭剂浓度,而KSV 是Stem-Volmer 方程常数。建议对实验体系进行校准,以得到研究用细胞类型的指示剂探针的Ksv,利用线性回归模型分析Stem-Volmer 方程。校准方法：使用双三丁基氧化锡和尼日利亚菌素(10-30μM)固定胞内氯离子浓度，通过线性回归分析确定Ksv。

注意事项

1、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3、荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。